Омела белая
Ботаническая характеристика омелы белой
Омела белая — Viscum album L. — вечнозеленый кустарничек из семейства ремнецветных (Loranfhaceae), растущий на ветвях деревьев. Стебли многочисленные, многократно вильчато-ветвящиеся, образуют кустики шарообразной формы, достигающие в поперечнике 120 см. Ветви с желтовато-зеленой корой. Листья супротивные, кожистые, толстые, светло- или желтовато-зеленые, продолговато-ланцетные или эллиптические, с дуговидным жилкованием, не опадающие на зиму.
Цветки скучены в малоцветковых пазушных соцветиях, мелкие, желтовато-зеленые, с простым 2 — 4-членным зеленоватым или желтоватым околоцветником, однополые, мужские с 3 — 4 тычинками, женские с 3 — 4 пестиками с нижними завязями. Растения обычно двудомные, но иногда встречаются особи, на которых развиты и женские, и мужские цветки. Плоды — сочные ягоды шаровидной или яйцевидной формы, диаметром до 1 см, сначала зеленого, а затем белого цвета, с 1 — 3 семенами, окруженными клейкой массой. Цветет рано весной, в марте, плоды созревают в августе — сентябре.
Встречается омела белая в основном в присредиземноморской области: в Южной Европе, Северной Африке, Малой Азии, но в Европе проникает до юга Скандинавии. В России распространена только в южных областях европейской части и на Северном Кавказе. Паразитирует на побегах груши, яблони, тополя, ивы, боярышника, белой акации, березы, липы, клена, сосны и других деревьев. Причиняет вред этим деревьям, особенно плодовым, поэтому с омелой борются в садах.
Лекарственное значение омелы и способы лечебного использования белой омелы
Омела известна с древнейших времен. Омела, «золотая ветвь», упоминается в «Энеиде» Вергилия. Он рассказывает о том, как пророчица Сивилла советует Энею добыть «золотую ветвь» в саду Персефоны и принести ее в жертву богине, чтобы попасть в подземное царство Аида для свидания с отцом.
С незапамятных времен омела служила в Европе предметом суеверного почитания — уж очень странным казалось это растение, взявшееся, как полагали, неизвестно откуда. Плиний Старший так описывает таинственный ритуал друидов, связанный со сбором омелы: «Не следует оставить без упоминания почитание, которым окружена омела по всей Галлии. Друиды, ибо так зовутся их маги, не считают ничего более священным, чем омела и дерево, на котором она растет, если только деревом этим является дуб. Больше того, священными рощами своими они считают дубовые рощи…»
Друиды верили, что все растущее на этом дереве послано небом и служит знамением того, что сам бог выбрал это дерево. Плиний сообщает, что целебная сила омелы возрастает, если ее сорвать в шестой день Луны, не применяя железа, и если ей не дать прикоснуться к земле. Тогда она якобы исцеляет от эпилепсии, заживляет раны и язвы и является великолепным средством для тушения пожара, способствует оплодотворению бесплодных женщин и скота. Шестой день Луны отмечал начало кельтского года, то есть период смерти всей растительности. Омела же не только оставалась зеленой, но и покрывалась плодами, которыми питались певчие дрозды, разбрасывая семена и участвуя тем самым в размножении вида. В зимний сезон омела символизировала неуничтожимую природу растительной жизни. Все целебные качества омелы связывали с происхождением омелы; она не произрастает, подобно другим растениям из земли, а приходит с неба, никогда не соприкасается с землей — иначе она потеряла бы свою силу. Поэтому ее стараются принять на белый холст.
Ее небесное происхождение и тот факт, что семена ее разносятся птицами, объясняет, почему употребление в пищу омелы давало возможность, по мнению древних германцев, общаться с духами. В соответствии с древними преданиями, именно духи распоряжаются мертвыми, оплодотворяют женщин и самок в стадах. И эту функцию приписывали омеле, чей смолистый сок имеет состав спермы. Галлы собирали исключительно омелу, произраставшую на дубах, хотя на них она встречается очень редко. Зато в изобилии — на яблонях и тополях. Друиды считали, что омела с дуба является как бы эманацией дерева. Употребляя омелу, вместе с нею впитывают и «воду дуба» — так называют омелу в некоторых кельтских диалектах. Омелу называют также семенем, кровью, даже маслом дуба. Отсюда становится понятным, почему эта «вода», сошедшая с небес вместе с молнией, которая очень часто поражает дубы, может считаться зашитой от пожара и даже средством его тушения.
Шведские крестьяне имели обыкновение вешать пучки омелы у потолков комнат как защиту от напастей вообще и от пожара в частности. «Громовой метлой» называли омелу в Швейцарии. Омеле приписывали свойства открывать любые замки, защищать от колдовства и магии.
Английские крестьяне верили, что больше всего вредят количеству молока и масла происки ведьм. Поэтому корове, отелившейся после Нового года, давали пожевать пучок омелы.
Японские айны относились к омеле с особым благоговением. Они считали ее лекарством почти от всех болезней: иногда пили ее настой или клали в пищу. Листья омелы предпочитали ее ягодам, так как ягоды слишком терпкие. Многие считали, что это растение обладает способностью делать плодоносными сады, огороды и поля. Для этого листья нарезали тонкими полосками, которые после произнесения над ними определенных молитв, сеяли вместе с просом и другими семенами.
В России встречаются два вида — омела белая и омела окрашенная (на Дальнем Востоке). Молодые ветки и листья используют как лекарство от гипертонии. Омела входит в состав препарата акофитум. В народной медицине ее используют как сердечно-сосудистое, противосклеротическое, желудочно-кишечное средство, а также при эпилепсии, легочных и маточных кровотечениях.
В мякоти плодов имеется каучуковая клейкая масса, удерживающая семена. Ядовитое вещество — вискотоксин — состоит из аминокислот и Сахаров. В состав входят: висцерин, а-вискол, В-вискол, олеиновая, урсоловая кислоты, холин, ацетилхолин, пропионилхолин, амины, тирамин и др.; спирты — пинит, квебрахит; жиры; в ягодах помимо перечисленных — инозид, аскорбиновая кислота, каротин, смолистые вещества. Как видим, настоящий склад химических веществ.
Сырьем, применяемым в народной медицине, являются листья и тонкие веточки или одни листья омелы белой. В настоящее время омелу применяют как вяжущее, слабое кровоостанавливающее, глистогонное, болеутоляющее, успокаивающее, понижающее артериальное давление и противораковое средства. Омела улучшает сердечную деятельность, повышает суточное выделение мочи и продуктов азотистого обмена, нормализует обмен веществ, рассасывает злокачественные опухоли и предупреждает их появление.
Омела нередко используется при лечении начальной стадии гипертонической болезни, атеросклероза, климактерических неврозов, маточных, геморроидальных, носовых и желудочных кровотечений (при последних она более эффективна в смеси с травой хвоща полевого). Назначают ее также при обильных менструациях, поносах, раннем климаксе у женщин, при эпилепсии, истерии, хронических заболеваниях суставов (подагре, ревматизме), нефритах, а также при онкологических заболеваниях. Принимают омелу и наружно как обезболивающее и смягчающее средство при фурункулезе, а также для спринцеваний при белях и эрозиях у женщин. Омела слабо ядовита, поэтому противопоказана беременным, кормящим матерям, детям.
При гипертонической болезни размолоть 2 чайные ложки с верхом омелы белой, заварить 2стаканами кипятка и оставить на ночь в термосе, утром процедить и принимать по 2 столовых ложки маленькими глотками 3раза в день за 15 — 20мин. до еды в течение 23 дней, потом 7дней отдыха. Затем повторить курс лечения. Общее время лечения — 4месяца.
При атеросклерозе омелу размолоть до муки, 1 чайную ложку залить 200 мл кипятка. Оставить на ночь в термосе. Пить по 2 столовых ложки за 15 — 20мин. до еды в течение 3 — 4 месяцев.
При болезни селезенки прикладывать компрессы из смеси измельченной омелы с известью.
При геморрое взять омелу белую (что растет на сосне), накрошить ее стебельки вместе с листьями (около 1 столовой ложки) в стакан с водой. Оставить на ночь, а утром натощак выпить настой. Процедуру повторять до полного выздоровления. Стебельки можно использовать по 2 — 3 раза. Эта рекомендация противопоказана людям с низким кровяным
давлением (при внутреннем геморрое).
При головокружении 1 чайную ложку омелы белой настаивать в 200мл холодной кипяченой воды. Принимать по 70мл Зраза в день.
Пить без дозировки чай из веточек с листьями омелы белой, собираемых с берез.
При несахарном диабете порошок из листьев рекомендуется принимать по 0,5— 2г (в зависимости от возраста) Зраза в день.
При истерии 1 чайную ложку сырья настаивать в 200мл холодной кипяченой воды. Принимать по 100мл Зраза в день.
При атеросклеротическом кардиосклерозе 35 — 40гизмельченных веток с листьями залить 1л кипятка, дать настояться. Пить столовыми ложками через час в течение дня.
При геморроидальном кровотечении 1 чайную ложку с верхом сухого сырья замочить на 12 час. в 200 мл холодной воды. Затем холодную настойку подогреть, процедить и пить. Выпить в течение дня маленькими порциями.
При легочном кровотечении настой из 1 чайной ложки омелы белой в 200 мл холодной кипяченой воды принимать по 60 мл 3 раза в день.
При менингите 1 столовую ложку с верхом измельченных веток омелы, сорванных с ивы или шелковицы, заварить 200мл кипятка и варить на водяной бане 15 — 20 мин. Отвар почти не имеет вкуса (чуть горьковатый), без запаха. Можно и удобно заваривать вместе с чаем и пить при менингите небактериального происхождения.
При сильных кровотечениях принимают порошок омелы по 1 — 1,5 г 3раза в день.
Можно смешать порошок из листьев омелы с медом в равных количествах и принимать по 2 г 3 раза в день при кровотечениях у гинекологических и онкологических больных.
При маточных кровотечениях хороший эффект дает применение смеси: листья и веточки омелы белой, трава хвоща полевого — по 20 г.
Смесь залить 1 л сухого белого вина и кипятить на медленном огне в закрытой посуде 10мин. Охлаждать 45мин., процедить. Принимать по 50 мл 3 — 4 раза в день.
При параличе 1 столовую ложку веточек и листьев настаивать ночь в 200мл теплой кипяченой воды. Пить по 70 мл 3раза в день до еды.
3 — 5 г веточек и листьев настаивать 1 — 2 часа в 200мл кипятка и пить по 100— 150мл теплого настоя 3раза в день, добавив мед по вкусу, ослабевшим людям старческого возраста, для поднятия жизненного тонуса.
При эпилепсии 1 чайную ложку омелы белой настаивать в 200мл холодной кипяченой воды. Принимать по 70мл 3раза в день.
Смесь: листья омелы, боярышник (цветки), сушеница (трава), пустырник (трава) — в равных долях.
4 столовые ложки смеси настаивать 8 час. в 1 л кипятка, процедить. Принимать по 0,5 стакана 3раза в день через 1 час после еды при гипертонической болезни.
Отвар побегов: 8г сухого измельченного сырья на 1 стакан горячей воды, кипятить 15 мин., процедить, довести объем до исходного. Принимать по 1 столовой ложке 3раза в день во время еды при начальных стадиях гипертонии, тиреотоксикозе, геморрое, гастрите, энтерите, желудочно-кишечном и геморроидальном кровотечениях, при бронхиальной астме, коклюше, туберкулезе легких, легочном кровотечении, при воспалительных заболеваниях почек.
При атеросклерозе отвар веток и листьев: 8г сухого измельченного сырья на 1 стакан горячей воды, кипятить на водяной бане 10мин., охлаждать ЗОмин., процедить, довести объем до исходного. Принимать по 1 столовой ложке 2—3раза в день во время еды.
Свежий сок омелы: по 1 чайной ложке 3раза в день при дизентерии, выпадении прямой кишки, отравлении ядовитыми растениями.
Отвар побегов: 60 г сухого измельченного сырья на 1 л горячей воды, кипятить 15мин., процедить, развести кипяченой водой. Использовать наружно для сидячих ванн и спринцевания при эрозии шейки матки и белях, для растираний и компрессов при радикулите, спондилите, ишиасе, артрите, Мышечных болях после ушиба и перелома.
От круглых глистов эффективен составной порошок: 0,5 г листьев омелы, 0,5 гее ягод, 1 г корня валерианы; смешать все и принимать по 0,5г 3раза в день в течение 3 дней. Порошок надо заливать водой и заедать свежей морковью.
Чай из омелы белой (1 чайная ложка на 1 стакан кипятка) пьют для поднятия жизненного тонуса ослабевшие люди пожилого возраста, а при головокружении — люди любого возраста.
Настой веток омелы с листьями: 35— 40 г на 1л воды. Принимают по 1 столовой ложке 3 раза в день до еды при неоперабельных формах рака.
Порошок из травы омелы белой: замесить на меду, скатать в шарики размером с пшеничное зерно. Принимать по 2— 3 шарика 3раза в день до еды при большой слабости у онкологических больных и при сильных кровотечениях.
Аптечные препараты:
Вискулен (Visculenum). Принимать по 20 капель 3 раза в день.
Жидкий экстракт омелы белой (Extr. Visci albi fluidum). Принимать по 20 — 30 капель 3 раза в день в течение 20 дней ежедневно.
20%-ная настойка омелы (Tinctura Visci albi). Принимать по 30— 50 капель 3 раза в день. Курс лечения — 3 — 4 недели.
Эти препараты следует принимать короткими курсами с перерывами , под обязательным контролем врача, так как омела токсична.
В Ботаническом словаре П. Седира читаем:
«Омела дубовая. Холодна и суха. Содержит силы Меркурия.
Ее infusum, будучи принят к концу менструации, облегчает зачатие.
Ягоды, высушенные, растертые в порошок и растворенные в крепком вине, полезны от эпилепсии. Друиды собирали омелу на Рождество с большими церемониями в час, точно определенный астрономическими вычислениями. Ягоды тогда бывают насыщены тройным магнетизмом: светил, дерева и благочестивой толпы, и в качестве собирателей магнетических сил они производили чудесные исцеления в самых безнадежных случаях болезни.
Если повесить на дерево ветку омелы вместе с крылом ласточки, то они привлекут на это дерево всех окрестных птиц. У германцев считается священной.
Омела, растущая на боярышнике, дает тинктуру, полезную от грудных болезней.
Фабр д’Оливе сообщает, что Рам — жрец гиперборейцев, был обязан божественному откровению искусством извлекать из омелы лекарство, излечивающее в несколько дней слоновую болезнь, эту ужасную болезнь -бич, уничтожавший кельтскую расу и считавшуюся неизлечимой. С. — Ив. д’Альвейдер прибавляет, что настоящую омелу очень трудно отличить от подобных ей паразитов, она проявляет свои чудесные свойства только при известных астрономических условиях».
Особенности заготовки лекарственного сырья
Для лекарственного употребления молодые побеги омелы собирают поздней осенью и зимой, когда опадает листва растений-хозяев и омела становится хорошо видимой. Ее кустики срезают секаторами, измельчают на части длиной до 5 — 10 см и сушат в сушилках или теплых помещениях, с листьями без плодов (плоды ядовиты, прием их ведет к тяжелым сердечным расстройствам).
Источник
Противоопухолевые свойства лектинов омелы белой
Д.Б. Корман
Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН
Среди огромного разнообразия средств, используемых в лекарственной альтернативной терапии рака, особое внимание привлекает ряд препаратов, имеющих устойчивый спрос на протяжении десятилетий, до настоящего времени широко применяемых врачами и больными, но, тем не менее, не вошедших в число конвенциальных лекарственных средств.
Вероятно, это обусловлено рядом фактором. Во-первых, эти препараты природного происхождения, имеют сложный композиционный состав и, как следствие, их трудно стандартизовать. Их активность и токсичность зависит от технологии получения исходного сырья, технологии приготовления лекарственных форм разными производителями. Во-вторых, в течение длительного времени попытки экспериментально обосновать противоопухолевую активность этих препаратов, как правило, были малоубедительными. Возможно, что к препаратам такого рода вообще не применимы стандартные модели скрининга веществ на противоопухолевую активность, применяющиеся при изучении классических противоопухолевых препаратов. К этому следует добавить, что механизмы действия этих препаратов оставались длительное времени неясными, так как имевшимися в то время методами их было невозможно установить. Как следствие всего этого не проводилось достаточно масштабных клинических испытаний, которые с достаточной степенью уверенности могли бы подтвердить или отвергнуть целесообразность практического применения этих препаратов для лечения онкологических больных.
Ситуация стала меняться в последние 10-15 лет. Применение новых методов молекулярно-биологических исследований позволило выявить некоторые особенности действия ряда препаратов лекарственной альтернативной терапии рака, которые, как оказалось, во многом сходны с действием современных таргетных препаратов. Удалось установить состав этих комплексных препаратов, выделить наиболее активные составляющие, обладающие наибольшим эффектом с точки зрения лечения рака. И, наконец, развитие генной инженерии и медицинской химии сделало возможным получение «чистых» соединений, что позволяет получать стандартизованные препараты в количествах, достаточных для всестороннего экспериментального и клинического изучения.
Среди таких средств лекарственной альтернативной терапии рака следует отметить препараты, получаемые из растения омела белая (Омела Европейская) (Viscum album L.) в виде экстрактов, их отдельных компонентов (лектин, агглютинин), а в последнее время в виде рекомбинантного препарата. Экстракты омелы давно (более полувека) используются в альтернативной терапии, особенно в таких странах Западной Европы, как Швейцария, Германия, Франция, Австрия. Приводятся данные, согласно которым в странах Европы и в настоящее время до ≈40% больных злокачественными опухолями на том или ином этапе заболевания обращаются к препаратам омелы белой [130]. В Германии, например, по данным 2001 года ежегодно тратилось на приобретение этих препаратов до 30 миллионов евро с тенденцией к увеличению этих расходов [126].
Противоопухолевые эффекты экстрактов омелы длительное время связывали исключительно с их иммуномодулирующим действием. В результате исследований последнего десятилетия выяснилось, что препараты омелы, подобно современным конвенциальным таргетным препаратам, способны прямо влиять на внутриклеточные мишени и процессы, вовлеченные в опухолевый рост. Открытие такого механизма противоопухолевого действия препаратов омелы белой стимулировало расширение экспериментальных и клинических исследований их противоопухолевых свойств.
Целью настоящего обзора является анализ накопленных научных данных о разных препаратах омелы белой, которые потенциально могут стать основой для создания нового эффективного противоопухолевого препарата.
Омела белая относится к роду полупаразитарных растений, представляет собой небольшой кустарник или траву, растущую на ветвях деревьев. Омела паразитирует на лиственных (дуб, яблоня, груша, тополь, клен) и хвойных (пихта, сосна, лиственница) деревьях. Для приготовления лекарственных средств используются экстракты, получаемые из молодых веток и листьев. Интересно отметить, что у древних кельтов омела считалась священным растением.
В 1981 году H. Franza сообщил о выделении из экстракта омелы лектина ML-I, который с тех пор стал рассматриваться как основное действующее вещество экстрактов омелы белой [45].
Напомним, что лектины – это широко распространенные в природе белки, обладающие свойством специфично и обратимо связывать как растворенные углеводы, так и функциональные группы углеводов в составе гликопротеинов и гликолипидов. С точки зрения предмета настоящей статьи особенное значение имеет способность лектинов связываться с углеводными компонентами клеточных мембран, в том числе опухолевых клеток.
Лектины омелы белой относятся к семейству растительных белков, инактиваторов рибосом II типа, которые по действию на млекопитающих подразделяются на токсические и нетоксические. Лектины омелы белой (Viscum lectin) относятся к подгруппе токсических инактиваторов рибосом наряду с рицином, абриеном, волкезином. К растительным белкам ингибиторам рибосом относят также рипроксимин, выделенный из растения Ximenia Americana, растущего в Танзании и используемого для лечения рака в традиционной африканской медицине [135].
Близкий по биологической активности, но отличающийся по структуре лектин (агглютинин, VCA) выделен из омелы окрашенной (омелы Корейской) (плоды имеют коричневый цвет) [78] и из омелы гималайской [98].
Все эти вещества считаются потенциальными ингибиторами синтеза белка в эукариотических клетках на уровне рибосом [100].
Белки инактиваторы рибосом состоят из двух полипептидных цепей (А и В), соединенных дисульфидным мостиком [46] (рис.1). Цепь А представляет собой РНК-гликозидазу, способную специфически гидролизовать аденин в большой субъединице рибосомы. В-цепь является гликопротеином, имеющим аффинность к определенным молекулам сахаров, в основном к галактозе. Механизмы токсических эффектов растительных белков инактиваторов рибосом II типа включают поступление белка в клетку, обусловленное связыванием В-цепи с молекулами сахара на клеточной поверхности с последующей интернализацией цепи А, которая катализирует инактивацию рибосом в результате депуринации одного аденозина в 28S рРНК субъединицы 60S рибосомы. Конечным результатом этих процессов является прекращение трансляции и синтеза белка [41, 74, 135].
Представляется уместным напомнить здесь, что рибосомы – это важнейшие немембранные органоиды живой эукариотической клетки, представляющие собой рибонуклеопротеидные комплексы, построенные из 2 субъединиц: большой с константой седиминтации (скорость оседания в ультрацентрифуге) 60S и малой с константой седиминтации 40S. Рибосомы служат для биосинтеза белка из аминокислот по заданной матрице на основе генетической информации, предоставляемой мРНК (трансляция). Функция рибосом заключается в узнавании трехбуквенных (трехнуклеотидных) кодонов мРНК, сопоставлении им соответствующих антикодонов транспортных тРНК, несущих аминокислоты, и присоединении этих аминокислот к растущей белковой цепи. Двигаясь вдоль мРНК, рибосома синтезирует белок в соответствии с информацией, заложенной в молекуле мРНК.
Имеются определенные структурные различия в цепях А и В лектинов, выделенных из Европейской, Корейской и Гималайской омелы. Они проявляются различиями в молекулярной массе этих цепей – в лектине Европейской омелы цепь А имеет молекулярную массу 55 kDa, цепь В – 63 kDa, тогда как в лектине из Корейской омелы молекулярные массы этих цепей составляют соответственно 31 kDA и 34 kDa. Выявлены и определенные различия в аминокислотных последовательностях этих лектинов [78, 98].
Основная часть лектинов, определяемых в экстрактах омелы белой, представлена лектином I (ML-I) (часто называемым вискумин –Viscumin) [100]. Другие лектины (лектин ML-II и ML-III) представлены в существенно меньших количествах. Считается, что антипролиферативный эффект экстракта определяется лектином ML-1, хотя имеются данные, что и остальные лектины играют роль в проявлении этого эффекта. Так, в культуре клеток MOLT 4 показано, что лектин III в 10 раз сильнее ингибирует рост этих клеток по сравнению с ML-1 [109]. Лектины омелы белой различаются по специфичности связывания с сахарами на мембране клеток. ML-1 связывается с D-галактозой, тогда как ML-II и ML-III связываются преимущественно с N-ацетил-D-галактозамином [45].
Для проявления цитотоксического действия лектинов омелы (индукции апоптоза), т.е. для противоопухолевого эффекта, необходима как энзематическая цепь А, так и способность цепи В связываться с углеводами [60, 100, 108]. Способность лектинов индуцировать апоптоз дала основание для выдвижения гипотезы, согласно которой эндогенные лектины являются филогенетически ранним механизмом для элиминации из организма клеток с измененной структурой углеводов в клеточной мембране [59].
Значение лектина ML-I в биологической активности препаратов омелы установлена в опытах in vivo с очищенным ML-I. Показано, что в результате введения очищенного лектина кроликам в крови животных достоверно увеличивается цитотоксичность натуральных киллеров, возрастает количество больших гранулярных лимфоцитов, усиливается фагоцитарная активность гранулоцитов. Аналогичные изменения наблюдались у больных раком молочной железы, получавших лечение экстрактом омелы белой [57]. Эти результаты расцениваются как экспериментальное подтверждение связи иммуномодулирующего действия экстракта с наличием в нем лектина ML-I. На основании подобных экспериментов стандартизацию экстрактов омелы белой стали проводить по определению в них активности галактозид-связывающего лектина ML-I.
Помимо лектинов экстракты омелы белой содержат вискотоксины, пептиды Куттата, полисахариды, алкалоиды, висцин и везикл, но их роль в биологических эффектах экстрактов омелы белой пока неясны [60]. Препараты омелы белой готовят либо в виде водных экстрактов (в некоторых случаях с добавлением ферментации), либо путем отжима [74]. С начала 2000-х годов для практического применения и исследования используют экстракты, стандартизованные по содержанию лектинов.
В Европе в течение почти семи десятилетий у онкологических больных и практикующих врачей популярен патентованный препарат Искадор, представляющий собой ферментированный, приготовленный по специальной технологии водный экстракт из листьев омелы белой [146].
Модификациями Искадора являются препараты Искадор QU, который приготовляется путем ферментации водного экстракта омелы, растущей на дубе, Искадор M, сырьем для которого служит омела белая, растущая на яблонях, Искадор Р, приготовляемый из омелы, растущей на сосне, Искадор А является экстрактом омелы белой, паразитирующей на пихте [61, 62].
Другим патентованным препаратом из омелы белой, применяемым в клинической практике, является Искуцин, представляющий собой водный экстракт из цельного высушенного растения, паразитирующего на разных деревьях. Экстрактом из цельного растения является также препарат Isorel.
Следует отметить, что имеющиеся на фармацевтическом рынке препараты омелы белой разных производителей различаются технологией получения экстрактов. Экстракты Искадор получают путем ферментации растительного материала, экстракты Abnoba получают при водной мацерации свежих растений, экстракты Helixor и Isorel получают путем холодной водной экстракции, экстракты Eurixor и Lectinol представляют собой водные экстракты свежего растения, собранного зимой на тополях и осине [102].
Отмечается, что препараты Искадора, полученные из разного сырья, могут различаться по иммуномодулирующей и противоопухолевой активности. Сравнительные исследования цитотоксичности разных экстрактов на клетках рака мочевого пузыря и рака молочной железы обнаружили значительные различия в их активности в зависимости от дерева-хозяина [35, 67]. Считается, что это связано с разным содержанием лектинов в разных экстрактах. Показано, что в Искадоре QU содержание тотальных лектинов составляет 54 нг/мл экстракта, в Искадоре М концентрация лектинов 25 нг/мл экстракта, а в Искадоре Р и Искадоре А содержание лектинов было существенно меньше (1,3 нг/мл и 1 нг/мл экстракта) [33]. Однако, как показали сравнительные исследования противоопухолевой активности этих экстрактов на 4 линиях клеток рака молочной железы и 4 линиях клеток рака мочевого пузыря, полной корреляции между содержанием лектинов в экстракте и его активностью нет. Наибольшей активностью обладал Искадор QU с самым высоким содержанием лектинов, однако Искадор А с наименьшим содержанием лектинов также обладал существенной активностью. Предполагается, что в этом препарате омелы белой помимо лектинов содержатся еще какие-то вещества, обладающие цитотоксическим действием [35].
Экстрактам омелы белой присущи все недостатки, характерные для препаратов природного происхождения, обусловленные в первую очередь сложностью их стандартизации. Биологические свойства разных препаратов зависят от особенностей роста на разных деревьях, на которых паразитирует омела, и региона ее произрастания, времени и условий получения исходного сырья, технологии его переработки, технологии получения лекарственных форм [60].
В 1999 году была разработана рекомбинантная технология получения биохимически чистого лектина ML-I, названного авискумин (rViscumin). Рекомбинантный ML-I был получен путем клонирования и раздельной экспрессии одиночных цепей А и В в Е.coli с последующим получением активного rML-I димера. Доказано, что рекомбинантный rML-1 обладает теми же биологическими свойствами, что и природный ML-I, содержащийся в экстрактах омелы белой, что позволило начать разносторонние экспериментальные исследования Авискумина, а в 2002 году приступить к клиническим испытаниям. [33, 60, 100, 117].
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ СВОЙСТВ
Экспериментальное исследование противоопухолевой активности препаратов омелы проводили при использовании их в дозах, различающихся на порядки, исходя из представлений, что в наномолярных концентрациях препарат оказывает иммуномодулирующее действие, которое может приводить к опосредованному противоопухолевому эффекту, а в существенно более высоких дозах обладает цитотоксическим действием. Возможно, с этим частично связан значительный разброс в результатах, полученных в разных исследованиях.
Противоопухолевые свойства лектинов омелы исследованы в опытах in vitro и in vivo, причем в последнем случае использовались разные пути введения препаратов, как системные (подкожно, внутривенно, перорально), так и местные (интратуморально, интраперетонеально). G. Kienle c cоавт. к 2009 году нашли 1632 публикации в различных научных журналах, посвященных различным аспектам исследования препаратов омелы белой в экспериментах in vitro и in vivo [74].
Исследования in vitro проводились с использованием разнообразных клеточных линий опухолей человека (меланома, множественная миелома, рак толстой кишки, опухоли центральной нервной системы, рак молочной железы, рак предстательной железы, рак матки, мелкоклеточный и немелкоклеточный рак легкого, гепатоцеллюлярный рак, рак мочевого пузыря, злокачественные лимфомы, острые лейкозы). Значительное число исследований in vitro выполнялось на стандартных опухолевых клеточных линиях (меланома В16, рак толстой кишки COLO, рак молочной железы MAXE401LL, эпидермальный рак А253, HELA, MILT-4, MEM-223 и пр.). На всех изученных моделях обнаружено разной степени выраженности дозо-зависимое подавление пролиферации опухолевых клеток, во многих исследованиях сочетающееся с появлением признаков, указывающих на индукцию апоптоза в опухолевых клетках. (71, 81, 82, 129, 132, 148].
В опытах in vitro с 6 линиями клеток меланомы человека обнаружено, что лектины омелы белой способны подавлять пролиферацию меланомных клеток в широком диапазоне концентраций (0,001-100 нг/мл), причем в одной из линий (MV3), ультрачувствительной в лектину ML-I, значительное ингибирование роста клеток наблюдалось при введении в культуру лектина в концентрации 1×10 -13 нг/мл. Интересно отметить, что этим феноменом объясняют авторы опубликованные в литературе случаи успешного применения препаратов омелы у отдельных больных меланомой [128].
На 6 разных линиях клеток множественной миеломы человека показано, что экстракт омелы белой ингибирует пролиферацию клеток всех линий и увеличивает число апоптотических клеток [82].
При сравнении цитостатического действия лектина омелы окрашенной на клетки рака толстой кишки человека (линия COLO), клетки эпидермального рака (А253) и нормальные клетки (WI-38) обнаружено, что клетки рака толстой кишки гораздо более чувствительны к лектину, чем клетки эпидермального рака. Эффект на клетках COLO имел дозо-зависимый характер в интервале концентраций 10-100 нг/мл с максимумом гибели клеток при концентрации 100 нг/мл. При инкубации клеток COLO с лектином в 64,7% клеток отмечены признаки апоптоза. Что касается нормальных клеток, то не зарегистрировано каких-либо изменений в их жизнеспособности под влиянием лектина [71].
Цитотоксическая активность экстрактов омелы белой обнаружена на клетках опухолей мозга. На 4 линиях медуллобластомы детей обнаружено, что под влиянием этих препаратов снижается митохондриальная активность и усиливается апоптоз опухолевых клеток. Сравнение 8 типов экстрактов, приготовленных из омелы, растущей на разных деревьях, показало, что все экстракты действуют на клетки всех 4 линий, но выраженность эффекта коррелировала с содержанием в них лектинов [148].
Цитотоксическая активность разных водных экстрактов омелы белой исследована в опытах in vitro с использованием панели из 16 линий клеток разных опухолей человека – опухоли центральной нервной системы, рак желудка, молочной и предстательной железы, почки, матки, немелкоклеточный рак легкого, меланома, гематологические опухоли. Опыты проводили с тремя препаратами – Искадор Qu, Искадор М и Искадор Р. Применение Искадора М сопровождалось подавлением пролиферации клеток на 30-70% в 3 линиях клеток, Искадора Qu – в 7. В то же время Искадор Р не оказывал антипролиферативного действия. Следует заметить, что этот препарат, в отличие от двух других, не содержит лектина ML-I. Наибольшее подавление клеточной пролиферации наблюдали при использовании Искадора Qu и Искадора М на клетках рака молочной железы линии MAXF 401NL – при концентрации препаратов 15 мкг/мл рост клеток тормозился более чем на 70%. Введение в культуры клеток всех изученных препаратов не приводило к стимуляции роста ни на одной линии [81, 94]. F. Knofl-Sidler с соавт. сравнили также влияние Искадора Qu, Искадора М и Abnovaviscum Fraxini-2 на пролиферацию клеток в разных культурах опухолевых клеток (HELA-S#, MOLT-4, MFM-223, COR-L51, KPL-1, VM-CUB1) и обнаружили, что все три препарата обладают цитотоксической активностью, но различия в чувствительности клеток разных опухолей к каждому из этих экстрактов омелы были весьма значительноми [81].
В большинстве случаев изучение разных экстрактов омелы белой показало, что цитотоксическая активность препаратов сильно коррелировала с содержанием в них лектина ML-I, хотя имеются данные, указывающие на возможную роль в этом эффекте и других лектинов омелы белой [19].
Аналогичные результаты были получены в более позднем исследовании, в котором изучалось влияние трех других экстрактов омелы белой (Helixor A, Helixor M, Helixor P) на панели из 38 клеточных линий опухолей человека. Цитотоксическая активность (подавление пролиферации клеток более чем на 70%) обнаружена у всех трех препаратов. Наиболее активным оказался Helixor P – рост клеток на 50% подавлялся при концентрации препарата 68,4 мгкг/мл, тогда как для Helixor M и Helixor А эти цифры составляли 114 мкг/мл и 133 мкг/мл соответственно [69].
На 9 разных клеточных линиях рака человека и двух линиях эндотелиальных клеток обнаружено, что чувствительность клеток разных линий к Искадору Qu значительно варьирует; наиболее значительный эффект наблюдали в культурах клеток мелкоклеточного рака легкого, аденокарциномы легкого и молочной железы и в эндотелиальных клетках. Малочувствительными к действию Искадора оказались клетки колоректального рака. A. Burger с соавт. при изучении антипролиферативной активности стандартизованного по лектину водного экстракта омелы белой на 25 клеточных линиях разных опухолей человека и на 47 ксенографтах разных опухолей обнаружили на всех опухолях четкую зависимость эффекта экстракта от дозы лектина. Чувствительность клеток разных опухолей к препарату была весьма вариабельной. Наиболее значительный эффект был отмечен в отношении клеток рака молочной железы, предстательной железы, почек, мелко- и немелкоклеточного рака легкого, острого лимфобластного лейкоза [15].
На 4 разных клеточных линиях рака мочевого пузыря человека (T24, TCCSUP, J82, UM-UC3) водный экстракт омелы оказывал антипролиферативное действие, блокируя рост опухолевых клеток и индуцируя апоптоз, интенсивность которого в клетках разных линий различалась [132].
Вызываемое лектинами омелы подавление клеточной пролиферации, очевидно, зависит от продолжительности воздействия. Так, в экспериментах с 6 линиями клеток опухолей человека (меланома, лимфосаркома, рак молочной железы, рак толстой кишки), в которых водный экстракт омелы белой, стандартизованный по содержанию лектина ML1, контактировал с клетками в течение разного времени (от 24 часов до 6 суток), обнаружено, что концентрации лектина, приводящая к 50%-ному ингибированию пролиферации (IC50) клеток меланомы линии SK-MEL-28, уменьшилась с 4,1нг/мл при 24-часовой инкубации до 0.16 нг/мл при 72-часовой инкубации и 0,18 нг/мл при воздействии в течение 5 суток. Клетки меланомы и лимфосаркомы были более чувствительны к действию экстракта, чем клетки рака молочной железы и рака толстой кишки [17].
В нескольких исследованиях сравнивалась противоопухолевая активность экстрактов омелы с активностью ряда стандартных препаратов. На культуре клеток множественной миеломы человека обнаружено, что в одинаковых дозах (10 мкг/10 5 клеток) экстракт достоверно сильнее ингибирует пролиферацию клеток, чем винкристин (p
Адрес
ул. В. Хоружей, 22, оф.1405, Минск 220123 Беларусь
Телефон
+(375 17) 242 17 38
+(375 29) 675 85 88
факс: (+375 17) 243 16 38
Источник
