Микробиологическая чистота лекарственных препаратов это

Микробиологическая чистота, как показатель качества лекарственных средств

Особенности лекарственных средств, влияющих на результаты микробиологических видов анализа. Государственные требования к медицинским препаратам. Сущность методов контроля и проведения испытаний над лекарствами. Проверка лечебного растительного сырья.

Рубрика	Медицина
Вид	курсовая работа
Язык	русский
Дата добавления	27.02.2015
Размер файла	33,4 K

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Размещено на http://www.allbest.ru/

ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ

ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ

МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

КАФЕДРА ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ ТЕХНОЛОГИИ

Курсовая работа на тему:

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ЧИСТОТА КАК ПОКАЗАТЕЛЬ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1 Государственные требования к лекарственным препаратам по показателю «Микробиологическая чистота»

1.2 Контроль лекарственных средств по показателю «Микробиологическая чистота»

1.3 Контроль лекарственного растительного сырья по показателю «Микробиологическая чистота»

ВЫВОДЫ

ЛИТЕРАТУРА

ВВЕДЕНИЕ

На современном этапе развития отечественной фармацевтической промышленности и в связи с введением на фармацевтических предприятиях России правил надлежащей производственной (GMP) и лабораторной (GLP) практик изменяются подходы к контролю качества лекарственных препаратов и субстанций. Необходимость контроля качества лекарственных средств обосновывается важностью обеспечения их безопасности и эффективности, т.е. снижения риска возникновения побочных реакций при применении потребителем. Таким образом, начиная с разработки новых фармацевтических препаратов, на всех этапах от производства до потребителя, необходимо оценивать вероятность риска выпуска некачественных средств и совершенствовать систему контроля, добиваясь обеспечения их качества. Особое место при этом занимают биологические методы исследований фармацевтических препаратов, относящиеся в первую очередь к области фармакологии и микробиологии.

Особенностью микробиологических видов анализов является специфика объекта исследования — живого микроорганизма, обладающего индивидуальными свойствами. К наиболее значимым особенностям лекарственных средств, влияющим на результаты анализа, относятся следующие:

· Наличие антимикробного действия самих ЛС или их компонентов, а также присутствие в некоторых из них консервантов, препятствующих выявлению микроорганизмов.

· Опережающий рост сопутствующей микрофлоры, затрудняющий определение микроорганизмов-контаминантов.

· Возможность присутствия в аналитических образцах микроорганизмов в «стрессовом» состоянии под воздействием условий технологического процесса производства ЛС, и неравномерное распределение контаминантов в образцах.

Учитывая прямую зависимость микробиологических показателей с безопасностью ЛС, результаты испытаний продукции должны быть максимально точными и надежными [2].

1.1 Государственные требования к лекарственным препаратам по показателю «Микробиологическая чистота»

Требования по микробиологической чистоте к лекарственным препаратам и субстанциям описаны в ОФС 42-0067-07 Государственной Фармакопеи РФ XII изд. [3]. Нестерильные лекарственные средства (субстанции, различные формы препаратов — таблетки, капсулы, гранулы, растворы, суспензии, сиропы, мази, суппозитории и др., а также вспомогательные вещества) могут быть контаминированы микроорганизмами. В них допускается наличие лимитированного количества микроорганизмов, при отсутствии определенных видов бактерий, представляющих опасность для здоровья человека.

Микробиологическая чистота лекарственных препаратов

¦ ¦предъявляется требование ¦стерильными ¦

¦2 ¦- Для применения местно, ¦- Общее число аэробных бактерий ¦

¦ ¦наружно, интравагинально ¦и грибов (суммарно) не более ¦

¦ ¦- Для введения в полости уха, ¦ 2 ¦

¦ ¦носа ¦10 в 1 г или в 1 мл, или на ¦

¦ ¦- Респираторно ¦1 пластырь (включая клейкую ¦

¦ ¦- Трансдермальные пластыри ¦сторону и основу) ¦

¦ ¦ ¦- Отсутствие энтеробактерий и ¦

¦ ¦За исключением тех ¦других грамотрицательных ¦

¦ ¦лекарственных препаратов, ¦бактерий на 1 пластырь (включая ¦

¦ ¦которые должны быть ¦клейкую сторону и основу) ¦

¦ ¦ ¦- Не более 10 энтеробактерий и ¦

¦ ¦ ¦бактерий в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦ ¦aeruginosa в 1 г или в 1 мл, или¦

¦ ¦ ¦на 1 пластырь (включая клейкую ¦

¦ ¦ ¦сторону и основу) ¦

¦ ¦ ¦aureus в 1 г или в 1 мл, или на ¦

¦ ¦ ¦1 пластырь (включая клейкую ¦

¦ ¦ ¦сторону и основу) ¦

¦3 ¦А. Для приема внутрь или ¦- Общее число аэробных бактерий ¦

¦ ¦введения ректально ¦ 3 ¦

¦ ¦ ¦не более 10 в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦ ¦- Общее число грибов не более ¦

¦ ¦ ¦10 в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦ ¦- Отсутствие Escherichia coli в ¦

¦ ¦Б. Для приема внутрь — из ¦- Общее число аэробных бактерий ¦

¦ ¦сырья природного происхождения¦ 4 ¦

¦ ¦(животного, растительного или ¦не более 10 в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦минерального), уровень ¦- Общее число грибов не более ¦

¦ ¦микробной загрязненности ¦ 2 ¦

¦ ¦которого невозможно снизить в ¦10 в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦процессе предварительной ¦- Энтеробактерий и других ¦

¦ ¦обработки и относительно ¦грамотрицательных бактерий не ¦

¦ ¦которого федеральный орган ¦ 2 ¦

¦ ¦контроля качества ¦более 10 в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦лекарственных средств ¦- Отсутствие Escherichia coli в ¦

¦ ¦допускает уровень микробной ¦1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦ 3 ¦- Отсутствие Salmonella в 10 г ¦

¦ ¦загрязненности более 10 ¦или в 10 мл ¦

¦ ¦жизнеспособных микроорганизмов¦- Отсутствие Staphylococcus ¦

¦ ¦в 1 г или в 1 мл ¦aureus в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦средства, включенные в ¦ ¦

¦4 ¦Лекарственные растительные ¦- Общее число аэробных бактерий ¦

¦ ¦средства, состоящие из одного ¦ 7 ¦

¦ ¦вида сырья (фасованная ¦не более 10 в 1 г ¦

¦ ¦продукция) или нескольких ¦- Общее число грибов не более ¦

¦ ¦(сборы), а также растительное ¦ 5 ¦

¦ ¦сырье «ангро» ¦10 в 1 г ¦

¦ ¦ ¦- Escherichia coli не более 10 ¦

¦ ¦А. Лекарственные растительные ¦- Общее число аэробных бактерий ¦

¦ ¦средства или лекарственное ¦ 5 ¦

¦ ¦сырье «ангро», применяемые в ¦не более 10 в 1 г ¦

¦ ¦виде настоев и отваров, ¦- Общее число грибов не более ¦

¦ ¦приготовленные с ¦ 4 ¦

¦ ¦использованием кипящей воды ¦10 в 1 г ¦

¦ ¦Б. Лекарственные растительные ¦- Энтеробактерий и других ¦

¦ ¦средства или растительное ¦грамотрицательных бактерий ¦

¦ ¦сырье «ангро», приготовленные ¦ 3 ¦

¦ ¦без использования кипящей воды¦не более 10 в 1 г ¦

¦ ¦ ¦- Отсутствие Escherichia coli в ¦

¦ ¦ ¦- Отсутствие Salmonella в 10 г ¦

Микробиологическая чистота субстанций и вспомогательных веществ для производства лекарственных препаратов

¦Категория¦ Субстанции, вспомогательные ¦ Рекомендуемые нормы ¦

¦1.2 ¦Субстанции для производства: ¦Субстанции должны быть ¦

¦ ¦А. Стерильных лекарственных ¦стерильными ¦

¦ ¦препаратов, которые не ¦ ¦

¦ ¦Б. Стерильных лекарственных ¦- Общее число аэробных бактерий ¦

¦ ¦препаратов, которые ¦и грибов (суммарно) не более ¦

¦ ¦подвергаются стерилизации ¦ 2 ¦

¦ ¦ ¦10 в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦ ¦в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦В. Нестерильных лекарственных ¦- Отсутствие Pseudomonas ¦

¦ ¦препаратов, относящихся к ¦aeruginosa в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦Категории 2 ¦- Отсутствие Staphylococcus ¦

¦ ¦ ¦aureus в 1 г или в 1 мл ¦

¦2.2 ¦Субстанции синтетического ¦- Общее число аэробных бактерий ¦

¦ ¦происхождения для производства¦ 3 ¦

¦ ¦нестерильных лекарственных ¦не более 10 в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦препаратов ¦- Общее число грибов не более ¦

¦ ¦ ¦10 в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦ ¦- Отсутствие Escherichia coli в ¦

¦3.2 ¦Субстанции природного ¦- Общее число аэробных бактерий ¦

¦ ¦происхождения (растительного, ¦ 4 ¦

¦ ¦животного или минерального) ¦не более 10 в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦для производства нестерильных ¦- Общее число грибов не более ¦

¦ ¦лекарственных препаратов ¦ 2 ¦

¦ ¦ ¦10 в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦ ¦- Отсутствие Escherichia coli в ¦

¦ ¦ ¦- Отсутствие Salmonella в 10 г ¦

¦ ¦ ¦aeruginosa в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦ ¦aureus в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦ ¦- Энтеробактерий не более 10 ¦

¦ ¦ ¦в 1 г или в 1 мл ¦

¦4.2 ¦Вспомогательные вещества (мука¦- Общее число аэробных бактерий ¦

¦ ¦пшеничная, крахмал, тальк и ¦ 3 ¦

¦ ¦т.д.) ¦не более 10 в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦ ¦- Общее число грибов не более ¦

¦ ¦ ¦10 в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦ ¦- Отсутствие Escherichia coli в ¦

¦ ¦ ¦- Отсутствие Salmonella в 10 г ¦

¦ ¦ ¦aeruginosa в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦ ¦aureus в 1 г или в 1 мл ¦

¦ ¦ ¦- Других энтеробактерий не более¦

¦ ¦ ¦10 в 1 г или в 1 мл ¦

Особого внимания заслуживает контроль микробиологической чистоты в аптечных учреждениях. Объектами микробиологического контроля в аптеках являются исходные, промежуточные и готовые продукты, вспомогательные вещества и материалы, руки и санитарная одежда персонала, воздушная среда и поверхности помещений и оборудования. Перечень контролируемой аптечной продукции и нормативы оценки ее микробиологической чистоты даны в табл. 3 в соответствии с действующими нормативными документами [4].

¦ N ¦ Наименование ¦ Требования ¦ Нормативный ¦

¦п/п ¦объекта контроля¦ к микробиологической ¦ документ ¦

¦1. ¦Вода очищенная ¦Не более ¦ФС 42-2619-97 ¦

¦ ¦ ¦в 1 мл при отсутствии ¦ ¦

¦2. ¦Вода для ¦Апирогенность ¦ФС 42-2620-97 ¦

¦3. ¦Инъекционные ¦Стерильность ¦ГФ XI, вып. 2, ¦

¦ ¦растворы после ¦ ¦стр. 187 ¦

¦4. ¦Глазные капли ¦Стерильность ¦ГФ XI, вып. 2, ¦

¦4.1.¦Глазные капли, ¦Стерильность ¦ГФ XI, вып. 2, ¦

¦ ¦приготовленные ¦ ¦стр. 187 ¦

¦5. ¦Основное сырье ¦Не более 100 бактерий ¦Изменение ¦

¦ ¦(субстанции) ¦и грибов суммарно ¦к статье ГФ XI, ¦

¦ ¦для производства¦в 1 г или 1 мл при ¦вып. 2, стр. 187 ¦

¦ ¦стерильных ¦отсутствии ¦»Методы ¦

¦ ¦препаратов ¦Enterobacteriaceae, ¦микробиологического¦

¦ ¦ ¦P. aeruginosa, ¦контроля ¦

¦ ¦ ¦S. aureus ¦лекарственных ¦

6. ¦Лекарственные ¦Стерильность ¦Приказ ¦

¦ ¦средства для ¦ ¦МЗ СССР N 1026 ¦

¦ ¦новорожденных ¦ ¦от 19.10.82 ¦

¦ ¦(растворы для ¦ ¦»Об усилении ¦

¦ ¦внутреннего и ¦ ¦контроля за ¦

¦ ¦глазные капли, ¦ ¦родильных ¦

¦ ¦масла для ¦ ¦домов, детских ¦

¦7. ¦Детские ¦Не более 50 бактерий ¦Изменение ¦

¦ ¦лекарственные ¦и грибов суммарно ¦к статье ГФ XI, ¦

¦ ¦средства ¦в 1 г или 1 мл при ¦вып. 2, стр. 187 ¦

¦ ¦(от 0 до 1 года)¦отсутствии ¦»Методы ¦

¦ ¦ ¦P. aeruginosa, ¦контроля ¦

¦ ¦ ¦S. aureus ¦лекарственных ¦

¦ ¦ ¦ ¦в аптеках (1994 г.)¦

Интервал времени от начала изготовления раствора до

стерилизации не должен превышать 3 часов.

1.2 Контроль лекарственных средств по показателю «Микробиологическая чистота»

Методы контроля и проведение испытаний ЛС на микробиологическую чистоту описаны в ГФ XII издания в ОФС 42-0067-07 [3].

Испытание на микробиологическую чистоту включает способы подготовки образцов различных лекарственных форм перед испытанием, отбор образцов для анализа, методы количественного определения жизнеспособных бактерий и грибов, выявление и идентификацию отдельных видов бактерий, наличие которых недопустимо или ограничено в нестерильных лекарственных средствах, а также питательные среды, растворы и реактивы. лекарственный препарат микробиологический сырье

Испытание проводят в асептических условиях, чтобы предотвратить контаминацию исследуемых образцов.

Перед проведением контроля необходимо определить, обладает ли исследуемое лекарственное средство в условиях испытания на микробиологическую чистоту антимикробным действием, подавляющим рост отдельных видов бактерий и грибов, так как это может привести к неправильной оценке результатов анализа.

Для устранения антимикробного действия препаратов применяют следующие методы:

— Используют соответствующие специфические инактиваторы (например, парааминобензойную кислоту (ПАБК) и бета-лактамазу), нейтрализующие антимикробное действие препарата, но не угнетающие рост микроорганизмов, контаминирующих НЛС.

— Используют неспецифические инактиваторы, добавляя в буферный раствор и/или в питательные среды: твин-20, твин-80, соевый или яичный лецитин и др.

— Увеличивают разведение препарата, взяв больший объем растворителя в пределах норм допустимой микробной загрязненности.

— Применяют метод мембранной фильтрации с последующей промывкой фильтров, если позволяет природа исследуемого лекарственного средства, и другие методы.

Для определения микробиологической чистоты в зависимости от природы лекарственного средства и его физико-химических свойств используют один из вариантов чашечного агарового метода (глубинный, двухслойный, поверхностный, модифицированный глубинный), метод мембранной фильтрации или пробирочный метод наиболее вероятных чисел (НВЧ). Данные методы подробно описаны в ГФ XII издания.

В статье [5] авторы подробно рассматривают проблему контроля качества лекарственных средств, обладающих противогрибковой активностью, так как микозы и микогенная аллергия являются актуальной медико-социальной проблемой для многих стран мира. Контроль качества противогрибковых средств требует предварительной подготовки проб перед анализом и подбора методов анализа с учетом специфики препарата. Например, микробиологическую чистоту препарата «Гризеофульвин» можно определять прямым посевом на питательные среды. Метод мембранной фильтрации не подходит, так как лекарственное средство не растворимо в воде, хотя в ФС 42-1877-98 описан именно это метод. Субстанция препарата «Микотербин» обладает настолько сильным противогрибковым действием, что его невозможно снять разведением. Поэтому предлагается исключить в дальнейшем для данного препарата испытание на количественное определение дрожжевых и плесневых грибов.

В источнике [6] обсуждается проблема испытаний на микробиологическую чистоту антисептических средств. Антисептические ЛС — это часть достаточно обширной группы препаратов, направленных на уничтожение или снижение количества микроорганизмов. Исследование качества АЛС по микробиологическим показателям вызывает определенные трудности. Это связано с тем, что АЛС в условиях определения их микробиологической чистоты обладают антимикробным действием, которое не всегда удается устранить методами, описанными в нормативной документации. В то же время нельзя отказаться от контроля качества АЛС без научных доказательств нецелесообразности проведения анализа, так как существуют данные о микробной контаминации различными бактериями и грибами некоторых антисептиков, включая хлоргексидин, спирт этиловый. К настоящему времени имеются данные о выделении различных клинически значимых бактерий и грибов из многих используемых в медицине антисептиков и дезинфектантов. Как правило, риску подвержены вещества, обладающие невысокой антимикробной активностью. К ним относятся четвертичные аммониевые соединения, некоторые йодофоры (поливинилпирролидонйод), фенолсодержащие препараты, хлоргексидин.

Для определения бактерицидной, фунгицидной и спороцидной активностей препаратов разработаны различные тесты: тесты с носителем, суспензионные тесты, тесты возможностей, практические тесты, отраслевые тесты (или тесты in-use). Тесты с носителем являются самыми первыми методами оценки эффективности антимикробных препаратов и были описаны еще Робертом Кохом в 1881 г. В роли носителей в таких тестах могут выступать кусочки ткани (т.н. батистовый метод), яичная скорлупа, шелковая нить или кетгут, металлические носители. В некоторых случаях носителем является рука человека. Методика заключается в следующем: носитель контаминируется взвесью тест-микроорганизма, высушивается, после чего приводится во взаимодействие с антисептиком или дезинфектантом и после определенного времени экспозиции помещается в питательную среду. Ограничением данного типа тестов является сложность стандартизации числа бактериальных клеток, оставшихся на носителе после контаминации.

При выполнении суспензионных тестов инокулят (посевной материал) вносят в раствор дезинфектанта, и, после определенного времени экспозиции, методом посева на питательную среду определяют «-цидное» действие препарата. Различают: качественный тест и количественные тесты. При выполнении качественного теста после необходимой экспозиции образец в количестве 0,1 мл добавляют в жидкую питательную среду. Наличие помутнения среды после инкубации свидетельствует о неэффективности дезинфицирующего средства. Основным недостатком данного метода является тот факт, что выжившая единичная бактериальная клетка после инкубации даёт такой же результат, как и исходная бактериальная суспензия, которая не подвергалась воздействию дезинфицирующего средства. Результаты являются репрезентативными в случае, если происходит полная гибель микроорганизмов при соответствующем разведении и времени экспозиции. Отличие количественного суспензионного теста заключается в том, что после экспозиции бактериальной суспензии с раствором антисептика и дезинфектанта, осуществляется подсчет выживших микроорганизмов, одним из двух способов: прямым посевом на питательную среду или мембранной фильтрацией.

Основной принцип количественного суспензионного теста с использованием прямого посева на питательную среду заключается в следующем: образец реакционной смеси после контакта с антисептиком высевают на твердые питательные среды, после инкубации подсчитывают количество выросших колоний и сравнивают с положительным контролем.

В положительном контроле в качестве разбавителя используют стерильную дистиллированную воду вместо дезинфектанта. Микробиоцидный эффект (МЕ) высчитывается по формуле:

МЕ=log Nc — log No,

Где Nc — количество колоний в положительном

Nо — количество колоний в исследуемом образце.

Метод мембранной фильтрации применяется в случае, если не удается найти эффективный нейтрализатор антимикробного действия. Преимуществом является тот факт, что нет необходимости использовать нейтрализатор, эффект нейтрализации достигается за счет использовании большого количества промывной жидкости.

Несмотря на то, что эти тесты достаточно хорошо стандартизованы, они не нашли широкого применения в качестве методов оценки бактерицидности, фунгицидности и спороцидности антисептиков и дезинфектантов.

1.3 Контроль лекарственного растительного сырья по показателю «Микробиологическая чистота»

В последнее время наблюдается устойчивая тенденция роста интереса населения, фармацевтических работников и практических врачей в нашей стране и за рубежом к использованию лекарственного растительного сырья и препаратов природного происхождения. Современную тенденцию возрождения интереса к лекарственным растениям в развитых странах определяют следующие причины: меньшая токсичность; возможность минимизации побочных действий и аллергизации; мягкость и широта терапевтического действия; возможность более длительного применения фитопрепаратов, особенно для лечения хронических заболеваний, которые являются причиной смерти до 80% больных; эффективность и незаменимость растительных лекарственных средств, содержащих сердечные гликозиды, стероидные гормоны, цитостатики. Удельный вес фитопрепаратов в некоторых фармакотерапевтических группах отечественных средств достигает 70-80%.

Микробиологическая чистота — важнейший показатель безопасности применения лекарственных растительных сырья (ЛРС) и препаратов, получаемых из него, особенно отваров и настоев. Заражение ЛРС микроорганизмами возможно, начиная со стадии заготовки, включая сушку, первичную обработку, измельчение и упаковку («ангро» и потребительскую) [7].

О «лекарственной инфекции» имеется достаточно информации. В зарубежной научной литературе описано много примеров заражения человека. Есть также сообщения о загрязнении извлечений из ЛРС, используемых в стоматологии, что приводило к серьёзным воспалениям слизистой полости рта. Применение настоев и отваров из обсеменённого бактериями и грибами сырья может привести к заболеваниям мочеполовой сферы и органов дыхания [8].

В статье [7] исследователи изучали микробиологическую чистоту некоторого ЛРС, и получили следующие результаты:

Бактерии (в 1 г) норма — не более 107 аэробных бактерий

Грибы (в 1 г) норма — не более 105 дрожже- вых плесневых грибов

Escherichia coli (в 1 г) норма — не более 102

Источник