Научная электронная библиотека
Перетрухина А. Т., Блинова Е. И.,
Глава 5. ПРЕПАРАТЫ, ПРИМЕНЯЕМЫЕ ПРОТИВ РАНЕВЫХ ИНФЕКЦИЙ
К раневым инфекциям в данном разделе относятся такие заболевания как газовая гангрена и столбняк.
Столбняк
Возбудитель столбняка относится к роду Clostridium, виду C. tetani и входит в группу 17 (Спорообразующие грамположительные палочки и кокки) определителя Берджи.
C. tetani — крупные, грамположительные палочки. Образуют споры, расположенные терминально, перитрихи. Капсул не образуют. Облигатные анаэробы. Не расщепляют углеводов, обладают слабыми протеолитическими свойствами.
Все C. tetani имеют общий О-антиген, а по специфическим жгутиковым Н-антигенам подразделяются на 10 сероваров. Штаммы всех сероваров вырабатывают один и тот же специфический столбнячный экзотоксин, который полностью нейтрализуется противостолбнячной сывороткой, полученной при иммунизации животных токсином любого штамма.
Столбнячный экзотоксин состоит из двух фракций: тетаноспазмина и тетанолизина. Тетаноспазмин проникает в ЦНС, распространяясь по периневральным пространствам, кровеносным и лимфатическим сосудам. Токсин блокирует освобождение ингибиторного медиатора в синапсах двигательных нервов, что приводит к развитию выраженной гиперфлексии и резких спазмов скелетных мышц в ответ на любое раздражение. Тетанолизин (тетаногемолизин) обладает гемолитическим, кардиотоксическим и летальным действием.
C. tetani распространены во всем мире; они находятся в почве, в навозе лошадей и других животных. Источником заражения являются животные и человек, которые выделяют клостридии с испражнениями в почву. В почве в виде спор они могут сохраняться десятилетиями. Заражение происходит при проникновении возбудителя в организм через дефекты кожи и слизистых оболочек при ранениях, ожогах, отморожениях, через операционные раны. При инфицировании пуповины у новорожденных возможно развитие столбняка. Больной столбняком не заразен для окружающих.
Возбудители столбняка не инвазивные микроорганизмы. Возбудитель остается на месте внедрения в области поврежденных тканей, в которые проникли споры.
Столбняк — тяжелое заболевание, клинически проявляющееся развитием судорожного синдрома, включающего болезненные сокращения и длительное напряжение мышц. Смерть обычно наступает в результате нарушения дыхания. Летальность при столбняке остается высокой и составляет около 50 %.
После перенесенной болезни иммунитет не вырабатывается.
Микробиологическая диагностика основана на обнаружении в крови больного столбнячного токсина. Для этого используют столбнячные диагностикумы.
Для этиотропной терапии столбняка обязательно применяют противостолбнячную антитоксическую сыворотку или противостолбнячный человеческий иммуноглобулин.
Для создания искусственного активного иммунитета в плановом порядке проводится вакцинация анатоксином, который входит в состав АДС, АКДС или септаанатоксина.
При обширных ранах проводят экстренную профилактику противостолбнячным иммуноглобулином и столбнячным анатоксином.
Адсорбированный столбнячный анатоксин
При активной профилактике столбняка в настоящее время используют столбнячный анатоксин как в виде монопрепарата, так и в составе ассоциированных вакцин, таких как АДС и АКДС (см. Препараты, применяемые против дифтерии).
Препарат представляет собой очищенный от балластных белков столбнячный токсин, обезвреженный формалином и теплом и сорбированный на гидроокиси алюминия. Анатоксин содержит в 1 мл 20 антигенных (антитоксинсвязывающих) единиц и не более 2 мг гидрата окиси алюминия. В качестве консерванта используют мертиолят (0,01 %) или фенол (0,25 %).
АС-анатоксин имеет вид беловатой или слегка желтоватой гомогенной суспензии. При стоянии в нем образуется осадок, который вместе с адсорбентом содержит активное начало препарата. Перед употреблением препарат необходимо тщательно взбалтывать, чтобы обеспечить равномерное распределение активного начала во всем объеме. При взбалтывании препарата образуется гомогенная суспензия, медленно оседающая при стоянии. Наличие в ней неразбивающихся комочков и хлопьев свидетельствует об изменении свойств адсорбента. Такие препараты непригодны для применения.
Анатоксин выпускают в ампулах, содержащих 1 мл препарата. Ампулы фасуют в картонные коробки по 10 ампул в каждой.
Хранить препарат следует в сухом темном месте при температуре 8-10 °С. Недопустимо замораживание препарата, приводящее к нарушению структуры адсорбента, образованию хлопьев и резкому снижению иммуногенности вследствие десорбции и денатурации активного начала.
Принципиальная схема активной иммунизации столбнячным анатоксином, обеспечивающая максимальную его эффективность (независимо от вида препарата, имеющего в своем составе столбнячный анатоксин), включает курс вакцинации и отдаленную ревакцинацию.
Для поддержания иммунитета на уровне, обеспечивающем защиту от столбняка, необходимо периодически с интервалом 5-10 лет производить повторные ревакцинации путем однократной инъекции препарата, содержащего столбнячный анатоксин.
Срок годности препарата — 3 года, по истечении которых после переконтроля срок годности может быть продлен еще на 1 год.
Противостолбнячная антитоксическая сыворотка
В настоящее время выпускается жидкая и сухая очищенная концентрированная сыворотка с большим количеством антитоксина.
Очищенную и концентрированную методом ферментативного гидролиза противостолбнячную сыворотку получают из крови лошадей, гипериммунизированных столбнячным анатоксином или токсином (сывортока должна содержать не менее 30 единиц связывания (ЕС) в 1 мл).
В жидком виде препарат представляет собой прозрачную или слегка опалесцирующую жидкость бледно-золотистого или желтоватого цвета.
Действующим началом препарата является столбнячный антитоксин, способный нейтрализовать действие столбнячного токсина. Активность сыворотки выражают в международных единицах (МЕ). Сыворотку выпускают в ампулах, в которых содержится 3000 МЕ столбнячного антитоксина (одна профилактическая доза). В коробки с противостолбнячной сывороткой вкладывают необходимое число ампул с разведенной 1:100 лошадиной сывороткой, предназначенной для определения чувствительности больного к лошадиному белку.
При экстренной профилактике столбняка ее вводят подкожно в дозе 3000 МЕ независимо от возраста. С лечебной целью сыворотку вводят в больших дозах (100000-200000 МЕ), с учетом тяжести заболевания внутримышечно и внутривенно. При необходимости в зависимости от тяжести заболевания введение сыворотки повторяют.
Противостолбнячную сыворотку необходимо хранить в темном сухом месте при температуре 3-8 °С. Сыворотка, подвергшаяся замораживанию и оттаиванию, но с неизменившимися физическими свойствами годна к применению.
Срок годности жидкой сыворотки — 3 года. По истечении его сыворотка может быть направлена для переконтроля и продления срока годности в изготовивший ее институт. Срок годности сухого препарата неограничен.
Столбнячный эритроцитарный диагностикум
Представляет собой взвесь в фосфатно-буферном физиологическом растворе формалинизированных, таннизированных эритроцитов барана, сенсибилизированных очищенным, концентрированным столбнячным анатоксином, который добавляется из расчета 5-10 ЕС на 1 мл подготовленных эритроцитов.
Применяется для обнаружения антител к столбнячному токсину, а также анатоксина и токсина с помощью реакции непрямой (пассивной) гемагглютинации и нейтрализации антител.
Срок годности препарата — 6 месяцев.
Иммуноглобулин человеческий противостолбнячный
Гомологичный противостолбнячный иммуноглобулин представляет собой раствор (10-16 %) гамма-глобулиновой фракции крови людей-доноров, ревакцинированных очищенным сорбированным столбнячным анатоксином.
Противостолбнячный иммуноглобулин выпускают в жидком виде в ампулах по 3 мл. В 1 мл препарата должно содержаться не менее 150 МЕ антитоксина.
Основное назначение препарата — пассивная экстренная профилактика столбняка у непривитых детей и взрослых. В случае необходимости иммуноглобулин может быть применен для лечения столбняка. Гомологичный противостолбнячный иммуноглобулин представляет собой единственный препарат, который может быть использован с целью профилактики столбняка у лиц с повышенной чувствительностью к лошадиной сыворотке. Гомологичный иммуноглобулин в отличие от лошадиной сыворотки практически неанафилактогенен.
Противостолбнячный иммуноглобулин применяют отдельно или в сочетании с АС-анатоксином (экстренная профилактика) при всех травмах с повреждением кожных покровов.
Профилактическая доза препарата 3 мл (не менее 450 МЕ). Вводят иммуноглобулин одномоментно внутримышечно в верхний наружный квадрант ягодицы при строгом соблюдении правил асептики.
Противопоказаний к применению не имеется. Реакция на введение препарата, как правило, отсутствует.
Иммуноглобулин следует хранить при температуре от 2 до 10 °С.
Срок годности — 3 года.
Газовая гангрена
Возбудители газовой гангрены относится к роду Clostridium, входят в группу 17 (Спорообразующие грамположительные палочки и кокки) и представлены следующими видами: C. perfringens, C. novyi, C. septicum, C. histolyticum, C. sordellii. Чаще других (90 %) заболевание вызывает C. perfringens.
C. perfringens — крупные палочки. Споры располагаются центрально. В организме образуют капсулу, неподвижны. Грамположительны. Облигатные анаэробы.
По антигенной специфичности экзотоксина выделяют 6 серологических вариантов: A, B, C, D, E, F.
Главным фактором патогенности C. perfringens является экзотоксин. Они обладают также высокой инвазивностью и продуцируют гиалуронидазу и другие ферменты агрессии.
C. perfringens — нормальный обитатель кишечника человека и животных, откуда попадает в почву, где в виде спор сохраняется годами.
C. perfringens и другие клостридии — некропаразиты. Наиболее опасны тяжелые повреждения с обширной раневой поверхностью, нарушением кровообращения, разможжением мышц. Попадая в такие раны (обычно с частичками почвы), в глубине поврежденных тканей (анаэробные условия) споры прорастают. Вегетативные формы размножаются и вырабатывают экзотоксин. Обладая высокой инвазивностью, они проникают в здоровую ткань, повреждают ее, образуя новые очаги некроза как результат действия ферментов и токсинов.
Газовая гангрена имеет достаточно четкие клинические проявления. Заболевание протекает без ярко выраженного воспаления, характерны прогрессирующий некроз тканей, отек, газообразование в тканях и общая интоксикация за счет действия как токсина возбудителя, так и продуктов распада тканей. Заболевание сопровождается формированием антитоксического иммунитета.
Основным методом микробиологической диагностики является бактериологическое исследование раневого отделяемого.
Этиотропная терапия проводится антитоксическими сыворотками (вначале поливалентной, а после идентификации возбудите-
ля — видоспецифической). Серотерапия должна сочетаться с эффективной антибиотикотерапией. Для специфической профилактики используют анатоксины.
Противогангренозные моно- и поливалентные сыворотки (жидкие)
С целью профилактики и лечения газовой гангрены применяют противогангренозные сыворотки, очищенные и концентрированные методом ферментативного гидролиза. Их получают из нативных противогангренозных сывороток крови лошадей, гипериммунизированных анатоксинами или токсинами возбудителей газовой гангрены.
Сыворотки выпускают как в виде поливалентного препарата, содержащего в одной ампуле антитоксины против трех и более видов возбудителей газовой гангрены, так и в виде моновалентных препаратов, содержащих антитоксины только одного вида. Поливалентная сыворотка может быть получена как от одной лошади путем гипериммунизации ее одновременно анатоксинами трех и более возбудителей газовой гангрены, так и путем смешивания соответствующих моновалентных сывороток.
Противогангренозные лечебно-профилактические сыворотки разливают в ампулы, размер которых зависит от объема препарата. Моновалентные сыворотки содержат в одной ампуле по 10000 МЕ, поливалентная сыворотка содержит в каждой ампуле по 10 МЕ всех видов. Сыворотка представляет собой прозрачную или незначительно опалесцирующую жидкость от бледно-золотистого до желтоватого цвета.
Сыворотку вводят лишь после определения чувствительности к лошадиному белку при помощи внутрикожной пробы.
С лечебной целью сыворотку вводят в случаях заболевания газовой гангреной после ранения, а также при других гангренозных заболеваниях (послеродовой анаэробный сепсис, гангрена легкого и др.). Лечебная доза составляет 150000 МЕ. До бактериологической диагностики необходимо применять поливалентную сыворотку или смесь моновалентных, после установления бактериологического диагноза — сыворотку, гомологичную с выделенным возбудителем. В зависимости от тяжести заболевания сыворотку можно вводить повторно. С лечебной целью сыворотку применяют внутривенно, вводят ее очень медленно.
Сыворотки необходимо хранить в темном и сухом помещении при температуре от 3 до 10 °С. Сыворотки, подвергшиеся замораживанию и оттаиванию, но с неизменившимися физическими свойствами, годны к применению.
Срок годности препаратов — 2 года. По истечении его сыворотки могут быть направлены для переконтроля и продления срока годности в изготовивший их институт.
Очищенный концентрированный адсорбированный септаанатоксин
Септаанатоксин — комплексный препарат, предназначенный для активной иммунизации людей одновременно против основных возбудителей газовой гангрены, столбняка и ботулизма.
Действующим началом этого препарата являются очищенные концентрированные анатоксины, полученные из токсинов, продуцируемых перечисленными возбудителями. В качестве сорбента используется гидроокись алюминия. Препарат стандартизируется таким образом, чтобы в 1 мл его содержалось следующее количество единиц связывания (ЕС), входящих в него анатоксинов: перфрингенс — 50; эдематис — 15; столбнячного — 20; ботулинового А — 10; В — 2,5; С — 5; Е — 10.
Очищенный концентрированный сорбированный септаанатоксин вводится подкожно, двукратно в дозе 1 мл с интервалом в 21 день. Через 6 месяцев производится ревакцинирующая инъекция (1 мл) препарата.
Срок годности септаанатоксина — 2 года.
Источник
Научная электронная библиотека
Перетрухина А. Т., Блинова Е. И.,
Глава 6. СЫВОРОТКИ
Мощным средством профилактики и терапии многих инфекционных заболеваний являются специфические, так называемые иммунные, сыворотки. Широкое распространение они получили и в лабораторной диагностике. В связи с этим приготовление сывороток занимает большое место в общей производственной деятельности институтов вакцин и сывороток. По своему назначению сыворотки делятся на лечебно-профилактические и диагностические.
Лечебно-профилактические сыворотки получают из крови иммунизированных животных или людей, в прошлом перенесших инфекционное заболевание и сохранивших в организме антитела против его возбудителя. Для получения сывороток из крови животных используют, главным образом, лошадей, которых гипериммунизируют теми или иными антигенами. Некоторые институты используют для этой цели коров, мулов, ослов, коз, однако гораздо реже, чем лошадей.
Предназначенные для производства сывороток лошади поступают из государственных животноводческих хозяйств, при условии эпизоотологического благополучия в районе их расположения. Прием лошадей производится после тщательного их клинического осмотра и проведения необходимых аллергических, серологических и бактериологических исследований. Пригодными для сывороточного производства считаются лошади в возрасте от 5 до 10 лет «сухой конституции», хорошей упитанности, весом не ниже 350 кг.
Отобранные для производства лошади отправляются в места их дальнейшей эксплуатации в сопровождении специально выделенных для наблюдения за ними лиц. Перед отправкой им вводят 5-10 мл столбнячного анатоксина для создания грунд-иммунитета. В производственных институтах вновь прибывших лошадей помещают в карантин на три месяца. В это время проводится тщательное клиническое наблюдение за состоянием их здоровья, и осуществляются лабораторно-клинические исследования, имеющие целью исключить сап, бруцеллез, туберкулез, инфекционный аборт, болезни крови, глистные инвазии и кожные заболевания.
В первые три недели никаких антигенов им не вводят, кроме столбнячного анатоксина (вторая инъекция — 10-20 мл для создания грунд-иммунитета). По истечении двадцати одного дня, если общее состояние лошади удовлетворительное, начинается иммунизация теми или иными антигенами в зависимости от задач института. Спустя 90 дней с момента прибытия карантин снимается, и здоровые лошади переводятся в иммунизационный отдел, где осуществляется их дальнейшая эксплуатация.
В иммунотделе все прибывшие лошади записываются в специальный журнал, который является своеобразной историей производственной жизни каждого продуцента. Поступающие в иммунотделы институтов лошади, как правило, находятся там до конца своей жизни, длительность которой, в зависимости от характера антигена, применяемого для иммунизации и схемы эксплуатации, исчисляется полутора — тремя годами. Обычный конец лошадей продуцентов иммунных сывороток — гибель от разрыва печени вследствие ее перерождения в процессе иммунизации или от искусственно-произведенного тотального кровопускания в тех случаях, когда дальнейшая эксплуатация лошади становится нерентабельной.
Лошади — продуценты сывороток — имеют специальный пищевой рацион, обеспечивающий их потребности в белках, углеводах, минеральных веществах и витаминах. В период их пребывания в иммунизационных отделах они постоянно находятся под наблюдением квалифицированных ветеринарных врачей. Каждая павшая лошадь подвергается вскрытию для выяснения причины гибели.
Схемы эксплуатации лошадей различны. Они определяются особенностями разных видов антигенов и характером реакции лошади.
Процесс гипериммунизации заключается в повторных введениях нарастающих количеств антигенов с более или менее длительными промежутками между инъекциями.
Подготовка лошади производится во время так называемого первого цикла иммунизации. В это время лошади вводят антиген, начиная с минимальных доз (5-10 мл) и постепенно доводят количество его до 200-300 мл. Время от времени проверяют содержание антител, появляющихся в сыворотке животного в результате иммунизации. Когда титр антител достигает нужного уровня, у лошади берут большое количество крови для приготовления сыворотки.
В тех случаях, когда на введение значительных объемов антигена лошадь в первом цикле не отвечает выработкой достаточного количества антител, иммунизацию прекращают. Чтобы приучить животное к будущим кровопусканиям, кровь берут, несмотря на низкий титр антител и так называемую нормальную сыворотку выпускают для приготовления питательных сред. После отдыха, предоставленного лошади, начинают второй цикл иммунизации. Этот цикл, как и все последующие, отличается тем, что лошадям делают две-три инъекции больших доз антигена; первая из них обычно равна половине той дозы, которой закончился предыдущий цикл.
Для гипериммунизации лошадей могут применяться различные антигены; в соответствии с характером их сыворотки делятся на антитоксические и антивирусные. Антитоксические сыворотки получают от лошадей, иммунизированных токсинами или анатоксинами, которые вводят подкожно. Для усиления антигенного раздражения и замедления всасывания к токсинам-анатоксинам добавляют различные депонирующие вещества, как-то: ланолин, хлористый кальций, квасцы, тапиоку. Применение этих веществ повышает эффективность иммунизации и позволяет получить сыворотки с более высокими титрами. Для получения противовирусных сывороток применяются антигены, полученные от животных, зараженных соответствующими вирусами, а также вируссодержащей жидкостью, полученной при выращивании вирусов в культурах тканей.
Введение антигенов производится с соблюдением всех правил асептики: лошадь должна быть хорошо вычищена, место инъекции после выстригания шерсти тщательно дезинфицируется, иглы и посуда, содержащая антиген, перед употреблением стерилизуются.
В результате введения антигенов у лошади может повышаться температура, иногда до 39-40 °С; повышенная температура держится 1-3 дня. Местное действие антигенов проявляется в образовании отеков и стерильных абсцессов, которые являются признаком хорошего иммунизаторного раздражения. Однако при нарушении правил асептики абсцессы могут нагнаиваться, что приводит к затяжному подъему температуры, выводит лошадь из строя и нарушает график эксплуатации. При прочих равных условиях качество сыворотки зависит в значительной мере от антигенных и иммуногенных свойств антигенов. Поэтому в лабораториях, изготавливающих антигены, уделяется большое внимание изучению их свойств.
Обычно максимальное накопление антител происходит к 5-7 дню после последнего введения антигена. В это время и производят кровопускание. Кровь, из расчета 1 литр с 50 кг веса лошади, берут из яремной вены в стерильную бутыль, содержащую 10 %-й раствор лимонно-кислого натрия в количестве, необходимом для предотвращения свертывания взятой крови. После каждого цикла иммунизации производят два, а при достаточно высоком титре антител и три кровопускания с промежутками в 48 часов. Лошади обычно хорошо переносят такие операции; белки плазмы быстро восстанавливаются, эритроциты — несколько медленнее — через 10-20 дней. После кровопускания лошади предоставляют отдых, во время которого и происходит восстановление утраченных белков и форменных элементов крови.
Полученная от лошадей кровь передается из иммунотдела в лабораторию технической обработки сыворотки. Здесь жидкая часть крови отделяется на сепараторах от форменных элементов и собирается в стерильные бутыли, после чего производится дефибринирование плазмы. Сыворотку отделяют от сгустков, разливают в. бутыли, консервируют хлороформом (0,5 %), фенолом (0,5 %) или хинозолом (0,025-0,05 %).
Антитоксические сыворотки выпускаются после предварительной очистки от балластных белков. Это позволяет сконцентрировать содержащиеся в них антитела и снизить сенсибилизирующие свойства. Кроме антитоксических сывороток очистке подвергаются и антивирусные.
Наиболее распространенные способы очистки сводятся к выделению псевдоглобулина сыворотки путем осаждения сернокислым аммонием или гамма-глобулина с помощью спиртоводных осадителей.
Известно, что антитела иммунных сывороток связаны с глобулинами; альбумины являются пассивными и, следовательно, ненужными белками. В гипериммунных сыворотках содержится от 55,7 до 88 % глобулинов по отношению к общему белку сыворотки. При добавлении сернокислого аммония можно осадить глобулины и путем фильтрации отделить их от альбуминов. Глобулины в свою очередь могут быть разделены на эвглобулины и псевдоглобулины. При изучении насыщенности антителами этих субфракций было показано, что антитоксины и вируснейтрализующие антитела связаны, главным образом, с псевдоглобулинами. Установлено также, что обработка глобулинов, перед разделением их, ферментом пепсином позволяет в последующем при осаждении сернокислым аммонием выделить псевдоглобулин в более чистом виде, чем это можно сделать без предварительного ферментирования.
Принцип очистки и концентрации сывороток сводится к следующему:
1. Извлечение общих глобулинов. Сыворотка разводится в три раза дистиллированной водой и на каждый литр полученной жидкости добавляется 450 г сухого химически чистого сернокислого аммония. Выпавшие в осадок глобулины отфильтровываются через специальную фильтроткань, отжимаются на прессах для освобождения от содержащегося в них раствора соли и подвергаются диализу через полупроницаемую мембрану (целлофановые или вискозные мешки) против проточной воды. Отфильтрованный альбумин выбрасывается, а глобулины подвергаются дальнейшей обработке.
2. Ферментация глобулинов. В полученном после диализа растворе глобулинов определяется количество белка, и затем он разводится водой так, чтобы довести содержание белка до трех процентов. После этого к раствору глобулинов добавляется определенное количество пепсина и ферментирование производится в течение 2 часов сначала при рН 3,2 (1 час), затем при рН 4,2 (также один час).
3. Разделение глобулинов. По окончании ферментации к раствору глобулинов добавляется сернокислый аммоний из расчета 140 г на 1 литр. Смесь прогревается при 58 °С в течение 45 минут. Осажденный эвглобулин отфильтровывается и выбрасывается. К фильтрату, содержащему сильно разбавленный псевдоглобулин, после подщелачивания до рН 7,0-7,1 добавляется сернокислый аммоний из расчета 200 г на 1 литр. Образовавшийся осадок псевдоглобулина отфильтровывается, прессуется в подвергается диализу,
Полученная после диализа жидкость представляет собой концентрированный раствор псевдоглобулина. Для более полной очистки он дополнительно обрабатывается хлороформом и соляной кислотой. Хлороформ добавляется в количестве 30 % к объему раствора после установления в нем рН 6,5-5,7, соляная кислота — в количестве, установленном специальной предварительной пробой. Выпавшие балластные белки удаляются центрифугированием в специальных центрифугах или с помощью сепараторов.
Стандартизация сыворотки. Этот процесс имеет целью придать полученному очищенному псевдоглобулину стандартные показатели, касающиеся содержания белка, значения рН и изотоничности раствора.
После определения исходного количества белка, псевдоглобулин разводится физиологическим раствором так, чтобы довести содержание белка до 17 %, рН устанавливается равным 7,0, количество хлористого натрия доводится до 0,85 %. Затем сыворотка освобождается от хлороформа (после этой операции он снова добавляется к сыворотке в строго определенном количестве, равном 0,5 %, уже как консервант) и подвергается стерилизующей фильтрации через бактериальные фильтры. В процессе производства контролируется стерильность, безвредность (включая определение апирогенности), устанавливается титр сыворотки, проверяются ее физические свойства. После проведения всех необходимых контролей препарат передается в цех разливки.
Готовая сыворотка представляет собой прозрачную жидкость, иногда полностью бесцветную, иногда окрашенную в желтоватый или зеленоватый цвет.
Сыворотка сохраняется при температуре 4-10 °С, срок годности ее 2 года. По истечении этого срока препарат, если он хранился в надлежащих условиях и не изменил своих физических свойств, может быть подвергнут повторному контролю в ближайшем Институте вакцин и сывороток. При сохранении титра и остальных показателей срок годности может быть продлен на 1 год с момента повторного контроля.
Сыворотки, подвергшиеся замораживанию и оттаиванию, если они при этом не потеряли своих физических свойств, признаются годными к употреблению.
Признаки непригодности сывороток: резкое помутнение, содержание неразбивающихся хлопьев, наличие посторонних включений.
Сушка сывороток. В принципе процесс высушивания сывороток не отличается от описанного выше процесса сушки вакцин и диагностических препаратов. Разница заключается в технической стороне дела, так как сыворотки должны высушиваться в значительно больших объёмах. Первый аппарат СБОС (сушка больших объемов сыворотки) может высушить в одной емкости до 20 литров очищенных сывороток. Установка состоит из сублиматора с вакуумным насосом и холодильного агрегата. Сублиматор предназначен для замораживания сыворотки и ее высушивания. Конденсатор улавливает пары, образующиеся при сушке, и замораживает их. В холодильном аппарате производится охлаждение переносчика холода (раствора хлористого кальция), который в процессе сушки непрерывно подается в сублиматор и конденсатор. Перед началом сушки сублиматор стерилизуется пропусканием пара и после того, как он остынет, в него подается стерильная сыворотка.
После заполнения сывороткой сублиматор присоединяется к устройству, подающему охлаждающую смесь с температурой -37. -40 °С, и при помощи мотора начинает вращаться со скоростью 10 оборотов в минуту. В этих условиях происходит намораживание сыворотки на внутренней цилиндрической поверхности сублиматора. По окончании намораживания подача охлаждающей смеси в рубашку сублиматора прекращается, и он соединяется с охлажденным конденсатором, в котором создан вакуум. Измерение температуры корпуса сублиматора и намороженного на нем слоя сыворотки производится с помощью вмонтированных термопар. Через 20-25 часов после начала сушки для ускорения ее начинается подогрев сублиматора с помощью воды, подаваемой из бойлера с автоматическим терморегулятором. Температура сублиматора и сыворотки постепенно повышается до 37-40 °С. После окончания сушки, сублиматор заполняется сухим стерильным воздухом. При помощи специального устройства, вмонтированного в аппарат, сухая сыворотка соскребается со стенок сублиматора и размельчается путем вращения его. Затем через разгрузочное отверстие сыворотка пересыпается в стерильный стеклянный контейнер, который при соблюдении правил стерильной работы закрывается плотной резиновой пробкой.
Коллекторные аппараты состоят из конденсатора с ловушкой паров влаги, коллектора с отводками, к которым с помощью вакуумной резины присоединяются 20-25 колб емкостью по 3 литра, вакуумного насоса и 2 ванны со змеевиками. Сыворотка разливается в стерильные колбы по 0,5-0,7 литра, после чего они погружаются в охлаждающую смесь температурой -20. -25 С°. Намораживание сыворотки тонким слоем на стенках колб обеспечивается вращением их. Когда сыворотка замерзнет, колбы помещают в смесь с более низкой температурой (-50 . -80 °С) на 1,5-2 часа. По истечении этого времени ватные пробки в колбах заменяются стерильными резиновыми с пропущенными через них металлическими штуцерами, на которых надета вакуумная резина для. присоединения к коллектору. Благодаря вакууму, создаваемому в коллекторе, происходит удаление влаги из сыворотки. Незадолго до окончания сушки колбы подогревают теплой водой до 30-35 °С. Процесс высушивания 13-15 литров сыворотки на этой установке продолжается 16-20 часов. По окончании сушки колбы с перекрытыми шлангами снимают с коллектора, переносят в стерильный бокс, где, соединив с воздушным ватным фильтром, заполняют сухим воздухом. Сухая сыворотка из колб пересыпается в стерильные широкогорлые бутыли, в которых она и сохраняется под плотными резиновыми пробками. Разлитая в ампулы готовая сыворотка высушивается аналогичным способом либо в камерных, либо на коллекторных аппаратах.
Высушенные препараты хранятся в сухом, темном помещении при температуре, не превышающей 20 °С. Срок хранения сыворотки не ограничен.
Источник
