Класс чистоты лекарственного средства это

Анализ чистоты лекарственных средств в фармацевтической химии

» data-shape=»round» data-use-links data-color-scheme=»normal» data-direction=»horizontal» data-services=»messenger,vkontakte,facebook,odnoklassniki,telegram,twitter,viber,whatsapp,moimir,lj,blogger»>

АНАЛИЗ ЧИСТОТЫ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

Анализ чистоты лекарственных средств является неотъемлемой и важной частью контроля их качества, поскольку наличие примесных соединений может не только снизить фармакологический эффект (например, появление 4-эпитетрацикли нов в тетрациклине) или оказать про­тивоположное действие (примесь иона-антагониста по фармаколо­гическому действию), но и сделать препарат более токсичным (на­личие примеси броматов в калия бромиде) или опасным для здоровья (примесь минеральных кислот в кислоте борной, примесь растворимых солей бария в бария сульфате для рентгеноскопии).

Основным принципом в требованиях к чистоте лекарственных средств является от­сутствие или ограниченное содержание тех примесей, которые мо­гут отрицательно влиять на их физические, химические и фармако­логические свойства.

Примеси в ЛС в зависимости от характера и свойств могут вли­ять на фармакологическое действие или не оказывают специфи­ческого действия, а их присутствие указывает на степень очистки вещества (например, примеси хлоридов, сульфатов). Однако для такого рода примесей необходимо устанавливать предельное их со­держание.

Нормирование содержания примесей предусмотрено в частных статьях ГФ в разделе «Испытания на чистоту». Уровень требований к качеству лекарственных средств зависит не только от технологического процесса их получения, но и от способа применения лекарственной формы. Например, к лекарственным веществам, используемым в инъекци­онных растворах, предъявляются дополнительные требования в от­ношении качества.

Источники примесей в лекарственных веществах — это техноло­гический процесс получения (качество исходного сырья, раство­рители, аппаратура, полупродукты синтеза), окружающая среда, упаковка. Примеси появляются в ПС и при их хранении (йод дей­ствием О₂, СО₂, влаги, света и других факторов).

В частной статье на каждое ЛС приведен перечень показателей, по которым устанавливается его чистота. Несоответствие лекарствен­ного вещества хотя бы одному из предусмотренных ЯД показате­лей указывает на изменение его качества, наличие или появление примесей в процессе хранения,

В медицине применяется только лекарственное средство, отве­чающее всем требованиям ГФ,

В ГФ имеется общая статья «Испытания на чистоту и допустимые пределы примесей», в которой приведены унифицированные мето­дики для определения примесей хлорид-ионов, сульфат-ионов, ионов аммония, кальция, железа, цинка, тяжелых металлов, мышьяка. При­готовление эталонных растворов на примесные соединения прово­дится по методикам частных ФС (например, определение количе­ства примеси салициловой кислоты в кислоте ацетилсалициловой).

ГФ использует 2 метода определения предела содержания при­месей: безэталонный и эталонный.

1. Безэталонный метод

В случаях, когда в частной ФС на лекарственное вещество ука­зано, что примесного вещества или иона «не должно быть», прово­дится испытание на это примесное вещество или ион; положитель­ным результатом будет их отсутствие в лекарственном веществе. Так, в лекарственном веществе натрия хлорид должны отсутство­вать ионы калия (антагонисты по фармакологическому действию); реакция с виннокаменной кислотой должна быть отрицательной. В воде очищенной не должно быть примесей ионов Сl – , Ca 2+ реак­ция на эти ионы должна быть отрицательной.

Причем отрицательная реакция на определяемый примесный ион или вещество может означать, что чувствительность реакции недо­статочна для определения данной примеси, т.е. говорить о полном отсутствии данной примеси нельзя. То же можно сказать и о других методах анализа, используемых для определения примесей.

2. Эталонный метод

Если предел содержания примесей дан в числовом выражении (например, в процентах), то используется эталонный метод. Так, содержание примеси хлоридов в препарате «Меди сульфат» по тре­бованию частной ФС должно быть не более 0,005%.

Для определения допустимого предела содержания примесей в ЛС проводят их количественную оценку с помощью соответствую­щих эталонных растворов — на цветность, мутность, примесные ве­щества и ионы.

Эталонные растворы содержат определенное количество примес­ного иона или примесного вещества. Сравнение проводят колори­метрическим (определение окраски) или нефелометрическим (оп­ределение мутности) методом.

Эталонные растворы готовят из соответствующих веществ взя­тием навески с точностью до 0,001 г. Готовят растворы А (для дли­тельного хранения) и из них — рабочие растворы Б и В путем раз­ведения до нужной концентрации.

Относительная ошибка эталонного метода определения предела содержания примеси составляет ± 10%. Эталонный метод более точен, чем безэталонный, поэтому часто используется для норми­рования содержания токсичных примесей (например, примеси мышьяка, тяжелых металлов и др.).

Допустимое количество примесей в лекарственном веществе может быть определено также путем титрования (например, коли­чество HI в 10% спиртовом растворе йода определяют титрованием NаОН), хроматографическим методом (например, посторонние сте­роиды в преднизолоне), колориметрическим, спектрофотометри­ческим и другими методами.

Для определения примесей химическими реакциями использу­ются специфические и высокочувствительные реакции. Специфи­ческими являются реакции, позволяющие обнаружить одни веще­ства в присутствии других.

Специфичность реакции во многом зависит от выбора оптималь­ных условий (создание необходимой реакции среды и др.). Чув­ствительность реакции характеризуется наименьшим количеством исследуемого вещества, которое может быть определено с помо­щью соответствующих реактивов в определенных условиях.

При испытании на чистоту должны соблюдаться требования ГФ, изложенные в общих замечаниях:

• Вода и реактивы должны быть свободны от ионов, на которые проводится испытание.
• Пробирки, в которых проводятся наблюдения, должны быть бесцветными и одинакового диаметра, чтобы столб жидкости был одинаковым в обеих пробирках.
• Добавление реактивов к испытуемому и эталонному раство­рам должно проводиться одновременно и в одинаковых количе­ствах.
• В случаях, когда в соответствующей статье ГФ указано, что в данной концентрации раствора не должно обнаруживаться той или иной примеси, поступают следующим образом: к испытуемому ра­створу прибавляют применяемые для каждой реакции, приведен­ные в статье реактивы, кроме основного, открывающего данную примесь. Раствор делят на 2 равные части и к одной из них прибав­ляют основной реактив. Оба раствора сравнивают. Между ними не должно быть различий,
• Окраску сравнивают при дневном отраженном свете на мато­во-белом фоне. Степень мутности определяют, сравнивая пробир­ки в проходящем свете на темном фоне.

Для проведения испытания на определение нормированного предела содержания примеси готовят раствор препарата (концент­рация указан;> в соответствующей частной статье). Затем готовят эталонный раствор примесного иона или вещества гой концентра­ции, которая соответствует требованию ГФ к содержанию данном примеси в препарате.

Для установления содержания примеси проводят цветную реак­цию или реакцию осаждения на испытуемую примесь как в анали­зируемом препарате, так и в эталонном растворе. Сравнивают ин­тенсивность окраски или степень мутности в обеих пробирках. Например, содержание ионов железа определяют с сульфосалици­ловой кислотой в аммиачной среде, которая с ионами Fе 3+ и Fе 2+ образует феррилсульфосалицилатные комплексы, окрашенные в зависимости от концентрации примеси в желтый или коричнево-­красный цвет:

Сравнивают окраску, полученную в анализируемом растворе, с таковой в эталонном растворе, который содержит определенную, известную концентрацию ионов железа. Если окраска в испытуемом растворе интенсивнее, чем в эталонном, значит, количество ионов железа превышает допустимый предел.

При определении примесей в частных статьях ГФ указана на­веска препарата, которую нельзя уменьшать (в меньшем количе­стве вещества искомую примесь можно не обнаружить). В некото­рых случаях берут довольно большие навески препаратов и после приготовления растворов из них проводят испытания на ряд при­месей. Так, после растворения 16,0 г натрия хлорида в 160 мл воды проводят в отдельных частях этого объема испытания на: «Про­зрачность и цветность», «Кислотность или щелочность», «Кальций», «Магний», «Барий», «Железо», «Тяжелые металлы».

Например, для натрия гидрокарбоната в частной статье в разде­ле «Прозрачность и цветность» указана, что раствор 0,5 г препарата в 10 мл воды должен быть бесцветным и по мутности не превышать эталон № 4.

Для определения бесцветности полученного раствора берут 2 одинаковые пробирки бесцветного стекла; в одну помещают 5 мл полученного раствора, в другую — 5 мл воды очищенной. Рассмат­ривают сверху обе жидкости на матово-белом фоне через весь слой. Если нет различий, раствор считается бесцветным.

Для определения менее растворимых примесей в натрия гидро­карбонате (нерастворимые карбонаты некоторых металлов) остав­шиеся 5 мл раствора наливают в пробирку, в такую же пробирку наливают 5 мл эталона мутности № 4. Сравнивают растворы при освещении электрической лампой матового стекла мощностью 40 Вт на черном фоне при вертикальном расположении пробирок. Если муть в испытуемом растворе выше, чем в эталонном, значит, коли­чество менее растворимых примесей в натрия гидрокарбонате пре­вышает допустимый предел.

На примере натрия гидрокарбоната видно, как ужесточаются требования к качеству ЛС, используемых для инъекций. Для на­трия гидрокарбоната, из которого готовят растворы для инъекций, также проводят дополнительное испытание. Его 5% раствор дол­жен быть прозрачным я бесцветным.

Примесные соединения и ионы в ЛС могут находиться вследствие недостаточной очистки при получении ЛС или появиться в процессе хранения под влиянием факторов окружающей среды (влаги, света, воздействия кислорода или диоксида углерода воздуха, тары и др.).

Для установления чистоты лекарственных веществ используют физические, химические и физико-химические методы анализа (см. разделы «Характеристика внешнего вида», «Растворимость»)

Определение прозрачности и степени мутности жидкостей

Определение окраски жидкостей

При оценке качества ряда Л С предусмотрено определение про­зрачности, бесцветности, степени мутности или окраски их раство­ров. Прозрачным считается раствор, в котором не наблюдается при­сутствия нерастворённых частиц, кроме единичных волокон. Раствор сравнивают с растворителем, взятым для приготовления данной жид­кости, на черном фоне. Бесцветными считаются жидкости, не отли­чающиеся по цвету от воды, а при испытании иных растворов — от взятого растворителя. Испытание проводят, сравнивая жидкости при дневном отраженном свете на матово-белом фоне.

Если необходимо определить количество менее растворимых, чем лекарственное вещество, примесей или количество окрашенных примесей, растворы сравнивают с эталонами мутности и цветнос­ти. Приготовление эталонных растворов описано в общих ФС: «Оп­ределение прозрачности и степени мутности жидкостей» и «Опре­деление окраски жидкостей». При определении степени окраски или мутности жидкости берут в равных объемах (не менее 5 мл). Пробирки, в которых проводится определение, должны быть оди­накового диаметра, а их стекло — одинаковой окраски.

Освоение методик анализа чистоты ЛС студентами осуществля­ется на примере воды очищенной.

Вода очищенная. Agua purificara

Вода очищенная получается методом дистилляции, обратным осмосом, ионным обменом и другими методами. Это наиболее ча­сто используемый растворитель для лекарственных веществ. На воде очищенной готовят микстуры, жидкости для наружного примене­ния. На воде для инъекций готовят инъекционные растворы, глаз­ные капли.

Вода очищенная должна соответствовать определенным требо­ваниям в отношении чистоты. Это должна быть бесцветная, про­зрачная жидкость без запаха и вкуса, с pH в пределах 5-7. Опреде­ление, в соответствии с требованиями ГФ, должно проводиться потенциометрическим методом,

В воде очищенной определяют сухой остаток посте выпарива­ния 100 мл. После высушивания при 100-105 °С до постоянного веса остаток не должен превышать 0,001%.

В воде очищенной не должно быть восстанавливающих веществ (остатки микроорганизмов). Это определение проводят путем ки­пячения 100 мл воды, 1 мл 0,01 н. раствора КМgО₄ и 2 мл разведен­ной Н₂SО₄ в течение 10 мин. Розовая окраска раствора должна со­храниться, а в случае присутствия восстанавливающих веществ, она исчезнет:

Вода легко поглощает СО₂. В воде очищенной этого примесного вещества не должно быть. Обнаруживают его по помутнению в присутствии известковой воды [Са(ОН)₂]. Определение ведут в те­чение 1 ч в закрытом сосуде, заполненном доверху равными объё­мами испытуемой воды и воды известковой. Помутнение указыва­ет на наличие СО₂, в воде очищенной:

В воде очищенной должны отсутствовать нитраты и нитриты, которые определяют по посинению раствора дифениламина (хи­мизм см. стр, 14,15).

Раствор дифениламина готовят на концентрированной Н₂SО₄.

В воде очищенной допускается содержание примесного иона аммония в пределах не более 0,00002%. Для опенки регламентиро­ванного количества аммиака в воде необходимо использовать эта­лонный раствор, содержащий 0,00002% аммиака. В испытуемой воде и в эталонном растворе проводят реакцию с реактивом Несслера (раствор К₂НgI₄ в КОН). Окраска в испытуемой воде не должна быть интенсивнее, чем в эталонном растворе:

В воде очищенной должны отсутствовать хлориды, сульфаты, ионы кальция и тяжелых металлов. Хлорид-ионы открывают по реакции с раствором AgNO₃ в присутствии HNO₃ (химизм — см. с. 18).

Не должно быть помутнения или опалесценции. Азотная кисло­та делает реакцию специфичной, т.к. осадки AgNO₃ с другими иона­ми (за исключением Br – и I – -ионов) в HNO₃ растворяются.

Сульфаты обнаруживают по реакции с раствором BaCl₂ в при­сутствии НС1, в которой растворяются осадки иона бария с други­ми ионами, например SO₃ 2- , СО₃ 2- (химизм — см, с. 14, 18). Не должно быть помутнения.

Ионы кальция обнаруживают по реакции с раствором оксалата аммония в присутствии аммиачного буфера, создающего оптималь­ные условия для реакции, pH 6,0 – 7,5 (химизм – см. с. 18). Не должно быть помутнения.

Ионы тяжелых металлов обнаруживают по реакции с раствором натрия сульфида в среде кислоты уксусной. Данная реакция по­зволяет выявить ионы тяжелых металлов, дающие с 8 2 ‘-ионами тем­ные осадки. Поскольку концентрация ионов крайне мала, наличие примесей ионов тяжелых металлов характеризуется появлением бурого окрашивания:

Микробиологическая чистота должна соответствовать требова­ниям, предъявляемым к питьевой воде не более 100 микроорганиз­мов в 1 мл при отсутствии бактерий семейств Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureiss, Pseudomonas aeruginosa. Испытания проводят в соответствии с ФС «Испытание на микробиологическую чистоту».

Хранится вода очищенная в закрытых емкостях, изготовленных из материалов, не изменяющих свойства воды и защищающих ее от инородных частиц и микробиологических загрязнений.

Вода для инъекций — Aqua pro injectionibus

Вода для инъекций должна отвечать требованиям, предъявляе­мым к воде очищенной. Кроме того, она должна быть апирогенной, не содержать антимикробных веществ и других добавок. Оп­ределение пирогенности проводят в соответствии с ФС «Испытание на пирогенность».

Для определения пирогенности инъекционных препаратов (и в том числе воды для инъекций) в настоящее время наряду с испыта­ниями на кроликах используют ЛАЛ-реактив. В ФС «Бактериаль­ные эндотоксины» описаны требования к ЛАЛ-реактиву, процеду­ра анализа, расчет предельного содержания бактериальных эндотоксинов.

ЛАЛ-тест основан на способности лизата амебоцитов (клеток крови) мечехвоста Limuius polyphemus (Лизат Амебоцитов Лиму- люс — ЛАЛ-реактив) специфически реагировать с эндотоксинами бактерий (липополисахаридами). Этот тест может быть использо­ван в медицине для ранней диагностики заболеваний, вызванных грамотрицательными бактериями. Реакция между эндотоксинами и лизатом дает помутнение реакционной смеси и увеличение ее вязкости вплоть до образования плотного геля. Такой результат является доказательством присутствия эндотоксинов. Анализ на­зывается гель-тромб-тестом и используется для определения соот­ветствия реального содержания бактериальных эндотоксинов пре­дельному их содержанию, указанному в частной статье ГФ (качественный анализ), а также для определения содержания бак­териальных эндотоксинов в испытуемом препарате (количествен­ный анализ).

Основным методом проведения анализа на соответствие показа­телю «Бактериальные эндотоксины» является качественный анализ (при отсутствии других указаний). Этот метод является также ар­битражным.

ЛАЛ-реактив представляет собой лиофилизированный препарат. Вода для ЛАЛ-теста должна соответствовать требованиям, предъяв­ляемым к воде для инъекций и не содержать бактериальные эндо­токсины в количествах, определяемых используемым ЛАЛ-реактивом в данном тесте.

Используют воду для инъекций свежеприготовленную или хра­нящуюся не более 24 ч при температуре 5-10 0 С или 80-95 0 С в закрытых ёмкостях, изготовленных из материалов, не изменяющих свойства воды, защищающих воду от попадания механических вклю­чений и микробиологического загрязнения.

Преимущество данного теста перед испытанием на кроликах зак­лючается в его высокой чувствительности. Кроме того, определе­ние не требует много времени — результат может быть получен через 30—60 мин.

Источник