Методические указания МУ 1.1.726-98 «Гигиеническое нормирование лекарственных средств в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и воде водных объектов» (утв. и введены в действие Главным государственным санитарным врачом РФ 28 декабря 1998 г.)
1.1. Общие вопросы. Гигиена, токсикология, санитария
Методические указания МУ 1.1.726-98
«Гигиеническое нормирование лекарственных средств в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и воде водных объектов»
(утв. и введены в действие Главным государственным санитарным врачом РФ 28 декабря 1998 г.)
Дата введения: с момента утверждения
Взамен Методических указаний
«Гигиеническая оценка и нормирование
лекарственных средств: МУ 1.1.587-96″,
утвержденных Госкомсанэпиднадзором
России 31 октября 1996 г.
1. Общие положения
1.1. Область применения
Методические указания (МУ) предназначены для научно-исследовательских институтов гигиенического профиля, медицинских институтов, ведомственных НИИ, токсикологических лабораторий и других учреждений, аккредитованных на право проведения разработок гигиенических нормативов, санитарных правил и норм, а также для органов государственного санитарно-эпидемиологического надзора и химико-фармацевтических предприятий.
МУ подготовлены в результате обобщения многолетнего опыта по гигиеническому нормированию ЛС в объектах производственной и окружающей среды и унификации требований и методов токсиколого-гигиенической оценки ЛС.
1.1.1. МУ разработаны с учетом специфического фармакологического действия лекарственных средств (ЛС) в дополнение к действующим нормативно-методическим документам, регламентирующим условия и подходы к обоснованию ПДК и ОБУВ химических веществ в воздухе рабочей зоны (6, 24, 25, 26, 28) и атмосферном воздухе населенных мест (2, 27), а также ПДК и ОДУ в воде водных объектов хозяйственно-литьевого и культурно-бытового водопользования (33).
1.1.2. При обосновании гигиенических нормативов в воздухе рабочей зоны настоящие МУ не распространяются на антимикробные препараты и антибиотики, гигиеническое нормирование которых проводится в соответствии с МУ (35).
1.2 Особенности нормирования лекарственных средств
Производство ЛС, являющихся в основном биологически высоко активными веществами, ставит перед органами санитарно-эпидемиологического надзора РФ и химико-фармацевтическими предприятиями задачу по предупреждению неблагоприятного воздействия ЛС на организм работающих, население и окружающую среду.
Для обеспечения опережающего развития исследований по разработке профилактических мероприятий необходима оптимизация методов обоснования гигиенических нормативов ЛС в различных объектах окружающей среды (воздух рабочей зоны, атмосферный воздух, вода водоемов).
Регламентирование содержания ЛС, как биологически активных препаратов, имеет ряд особенностей, обусловленных существующей системой разработки, изучения, регистрации и внедрения ЛС, а также условиями их промышленного применения и производства (1, 19, 21, 52, 54).
Для химико-фармацевтических предприятий, как правило, характерны небольшой объем выпуска конечных продуктов, широкая номенклатура ЛС и промежуточных продуктов синтеза, прерывистый и многостадийный характер технологических процессов, периодичность годового производства, небольшая продолжительность завершающих стадий получения ЛС.
Промышленному выпуску ЛС предшествуют разносторонние исследования биологической активности и токсических свойств в эксперименте на животных и испытания в клинических условиях. Это позволяет в ряде случаев существенно сократить объем токсикологических исследований по обоснованию гигиенических нормативов, а также использовать результаты доклинических экспериментальных и клинических испытаний для более надежного установления значений пороговых доз и концентраций, а также определения объема и направления гигиенической регламентации (1, 3, 19, 52, 54, 56).
1.2.1. Принципиальные подходы к гигиеническому нормированию ЛС не отличаются от общей методологии установления ПДК, ОБУВ, ОДУ химических веществ. Однако в связи с рядом особенностей ЛС, как специфического фактора загрязнений производственной и окружающей среды, создаются предпосылки для оптимизации, а в ряде случаев и существенного сокращения токсикологических исследований.
1.2.2. ЛС — вещество природного или синтетического происхождения или смесь веществ, используемых для лечения, профилактики и диагностики болезней; к ЛС относятся также препараты для предупреждения беременности. В России к ЛС относят средства, разрешенные Министерством Здравоохранения РФ для применения в установленном порядке.
1.2.3. На предприятиях по производству и переработке ЛС для всех веществ (сырье, промежуточные продукты, побочные продукты, вспомогательные вещества, конечные продукты и др.) должны разрабатываться гигиенические нормативы и методы аналитического определения их содержания в воздухе рабочей зоны и объектах окружающей среды (атмосферный воздух, вода водных объектов) с учетом гигиенических критериев для обоснования необходимости разработки ПДК и ОБУВ (ОДУ) вредных веществ (25).
1.2.4. При производстве готовых лекарственных форм, в том числе комбинированных, гигиеническому нормированию подлежат как субстанции всех ЛС, входящих в комбинацию, так и все вспомогательные вещества (наполнители, подсластители, разрыхлители, эмульгаторы и др.).
Токсиколого-гигиеническая оценка, изучение комбинированного действия, гигиеническое нормирование проводится с учетом биологической активности, степени токсичности и опасности основных и вспомогательных компонентов в соответствии с требованиями к постановке экспериментальных исследований по изучению характера комбинированного действия химических веществ (38) и нормирования смесей постоянного состава в воде (33).
1.2.5. При изучении и обосновании гигиенических нормативов ЛС необходимо учитывать следующее:
— высокую тропность или селективность к регулирующим центрам и определенным группам рецепторов, т.е. избирательность фармакологического действия;
— широкий диапазон фармакологических эффектов и величин терапевтических доз: от сотых долей мг (эстрогены) и нескольких мг (сердечные гликозиды, нейромедиаторы, некоторые антигипертензивные ЛС и др.) до десятков г (осмотические диуретики, корректоры кислотно-щелочного равновесия и др.);
— возможность развития отдаленных эффектов, в том числе влияние на синтез ДНК и РНК (цитостатики); возможность прямого воздействия на генеративную функцию (гормоны); способность вызывать психическую и физическую зависимость (наркотики);
— большие различия в объеме производства (от нескольких кг до десятков тонн в год), в численности занятых рабочих (от 2 — 3 до 30 и более человек), в объеме выбросов в атмосферу (от одного кг до нескольких десятков тонн в год) и сбросов сточных вод в водоемы;
— наличие исходной информации о фармакологических и токсикологических свойствах исследуемого ЛС, материалов клинических испытаний и/или ретроспективных клинико-эпидемиологических данных;
— преимущественное агрегатное состояние в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе населенных мест в виде мелкодисперсных аэрозолей, так как ЛС в подавляющем большинстве являются кристаллическими порошками;
— способность многих ЛС активно изменять органолептические свойства воздуха и воды (запах, вкус, окраска, мутность, пенообразование);
— высокую стабильность ЛС, часто оцениваемую в фармакологии как благоприятное свойство, обеспечивающее пролонгированное терапевтическое действие, которая с гигиенических позиций является дополнительным показателем опасности (36);
— ЛС часто представляют собой комплекс из нескольких ингредиентов, что требует особых методических подходов при оценке их опасности и нормировании (38); см. также разделы 2.2.7.3, 3.4.4 и 4.11 настоящих МУ.
Сведения о ЛС содержатся в Государственном реестре, XI Государственной фармакопее. Государственная фармакопея регламентирует уровни высших допустимых (разовых и суточных) доз для ядовитых (список А) и сильнодействующих (список Б) ЛС.
Основные характеристики и этапы создания ЛС представлены в приложении 1 (10, 16, 17, 19, 21, 52, 54, 58).
1.2.6. Для обоснования гигиенического норматива ЛС необходимы сведения о его химическом строении, физико-химических характеристиках, условиях производства, фармакологической активности, токсических свойствах (приложение 1; см. также п. 4.2).
1.2.7. Выбор адекватных методов и тестов для токсикологического исследования должен опираться на следующую информацию:
— механизм действия и специфические эффекты — для выбора тестов;
— противопоказания и побочные эффекты — для выявления характера токсического действия;
— принадлежность к структурному химическому ряду — для использования информации о близких по строению веществах;
— пути и способы введения — для определения опасности дополнительных путей поступления из окружающей среды, например, кожно-резорбтивного;
— кратность и продолжительность клинического применения — для предварительной оценки кумулятивных свойств;
— распространенность и частота применения населением — для определения схемы эксперимента, например, сроков проведения материальных нагрузок.
1.2.8. При отсутствии гигиенических нормативов (ПДК) и методов анализа ЛС ввод в эксплуатацию серийных производств или технологических процессов на основе промышленного регламента не допускается.
1.2.9. ОБУВ в воздухе рабочей зоны — временный ориентировочный гигиенический норматив. ОБУВ обосновывается путем расчета на основании параметров токсикометрии и терапевтических доз с использованием корреляционных зависимостей или путем интерполяций или экстраполяции в рядах соединений, близких по химической структуре, физико-химическим свойствам и характеру биологического действия с учетом положений, изложенных в методических указаниях по установлению ориентировочно безопасных уровней воздействия вредных веществ в воздухе рабочей зоны (26). ОБУВ утверждается Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации сроком на 3 года, после чего указанный норматив может быть заменен постоянно действующим гигиеническим нормативом (ПДК) или переутвержден на новый срок в зависимости от перспективы производства и новой информации о токсических свойствах (4, 6).
ОБУВ устанавливается на период, предшествующий проектированию (для условий опытных и полузаводских установок). При проектировании производства, по согласованию с органами государственного санитарного надзора, допускается использование ОБУВ величиной не менее в воздухе рабочей зоны (умеренно и малоопасные вещества).
Одновременно с обоснованием ПДК или ОБУВ веществ разрабатываются методы их контроля в воздухе рабочей зоны (5, 6).
1.2.10. Величина ОБУВ в атмосферном воздухе населенных мест устанавливается на срок 3 года для решения вопросов предупредительного санитарного надзора, обоснования требований к разработке санитарно-технических решений по охране атмосферного воздуха проектируемых предприятий по производству ЛС в соответствии с методическими указаниями по установлению ОБУВ загрязняющих веществ в атмосферном воздухе населенных мест (27).
1.2.11. ОДУ вещества в воде водных объектов хозяйственно-питьевого и культурно-бытового водопользования — временный гигиенический норматив. ОДУ разрабатывается на основе расчетных и экспресс-экспериментальных методов прогноза токсичности.
ОДУ применяется только на стадии предупредительного санитарного надзора за проектируемыми или строящимися предприятиями, реконструируемыми очистными сооружениями.
ОДУ устанавливается на срок 3 года. По истечении этого срока величина ОДУ отменяется, или должна быть пересмотрена, или заменяется научно обоснованной величиной ПДК с учетом представленных в Комиссию по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России материалов.
При необходимости продления срока действия ОДУ, либо перевода ОДУ в ранг ПДК, Комиссия по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию рассматривает материалы обоснования ОДУ и направляет их на утверждение в Минздрав России с соответствующими рекомендациями. С момента утверждения величины ПДК ранее установленный ОДУ для данного вещества утрачивает силу (51).
ОДУ не применяется для текущего санитарного надзора, для надзора за загрязнением водных объектов. Поэтому разработка методов контроля для веществ, на которые устанавливаются ОДУ, не обязательна.
1.2.12. Государственный контроль за соблюдением настоящих положений осуществляется органами и учреждениями Госсанэпиднадзора МЗ РФ.
2. Гигиеническое нормирование лекарственных средств в воздухе рабочей зоны
2.1. Критерии для постановки исследований по обоснованию ОБУВ и ПДК ЛС в воздухе рабочей зоны
Критерии приоритетности и объема токсикологического исследования вредных веществ определены, в основном, действующими методическими указаниями (24, 25, 27, 28). Однако с учетом особенностей присущих ЛС, необходимо руководствоваться дополнительными условиями.
2.1.1. Гигиеническому нормированию в полном объеме, с проведением хронического токсикологического эксперимента, подлежат ЛС с относительно большими объемами производства (свыше 5 т в год, при количестве занятых работающих свыше 30 чел.).
2.1.2. Сокращение объема исследований и обоснование ПДК с использованием ускоренных методов возможно при соответствии изучаемого вещества ранее утвержденным критериям (24, 25, 40, 43), а также:
— при принадлежности ЛС к фармакологической группе, представители которой имеют утвержденную величину ПДК для воздуха рабочей зоны;
— годовом объеме производства до 5 тонн, количестве работающих, контактирующих с веществом, менее 30 человек.
— Ускоренное обоснование ПДК ЛС требует проведения исследований в объеме 1 и 2 этапов гигиенической регламентации (приложение 2).
2.1.3. Определение гигиенических нормативов (ПДК) нецелесообразно для высокоактивных ЛС, производство которых осуществляется периодически (2 — 3 мес. в год) в небольшом объеме (не более 200 кг/год) ограниченным контингентом работающих (не более 10 человек). К таким ЛС относятся:
— вещества с узкой зоной терапевтического действия — ТИ до 5 и низким уровнем терапевтических доз — МСТД менее 0,05 г, ВСТД менее 0,1 г;
— вещества с потенциальной возможностью отдаленных проявлений вредного эффекта: признанные канцерогенами — 1 — 2А группы (в соответствии с новой классификацией МАИР); способные вызывать психическую и физическую зависимость; оказывать влияние на синтез нуклеиновых кислот или прямое воздействие на генеративную функцию.
Оценка ЛС, отнесенных к указанным фармакологическим группам, проводится в объеме токсикологической экспертизы (этап I, приложение 2), с привлечением к обоснованию ретроспективных данных по их использованию в медицинской практике, данных доклинических и клинических испытаний (1, 10, 16, 17, 19, 21, 52, 54, 56, 58).
ГАРАНТ:
Здесь и далее по тексту нумерация разделов приводится в соответствии с источником
2.1.3.2. В условиях производства с ЛС, отнесенными к этим группам, исключается любой производственный контакт с веществом (вдыхание, попадание на кожу, заглатывание) (раздел 2.1.3). Полное исключение контакта обеспечивается индивидуальными, в том числе изолирующими, средствами защиты, проведением технологических операций по их обработке в герметичных боксах и др. Необходимы периодические медицинские осмотры, контроль за состоянием воздушной среды, загрязнением кожных покровов (по показаниям).
Нижний предел измерения ( ) может быть уменьшен путем концентрирования пробы и увеличением времени ее отбора, которое может составлять до 70% рабочей смены. Для отбора проб воздуха наиболее целесообразно использовать фильтры из ультратонкого стекловолокна марки ФСВ-А. При скорости аспирирования выше 20 л/мин, во избежание повреждения фильтра, в патрон за фильтром необходимо установить металлическую сетку и через каждые 30 минут отбора заменять фильтр. Суммарная погрешность измерений не должна превышать 25%.
2.1.4. Клинико-гигиеническая проверка ПДК проводится путем изучения условий труда и состояния здоровья рабочих на действующих относительно крупнотоннажных предприятиях (годовой объем производства свыше 5 т, количество занятых рабочих свыше 30 чел.) в соответствии с МУ (24, 42).
2.2. Основные этапы токсикологических и гигиенических исследований
Исследования по гигиенической регламентации ЛС проводятся в соответствии с этапами, представленными в приложении 2. Экспериментальное изучение токсичности и определение параметров токсикометрии осуществляется по общепринятым требованиям (24, 25, 26) с учетом особенностей ЛС как специфического химического фактора, производственной среды. Качество лабораторных животных, их содержание и затравочная техника должны соответствовать действующим методическим указаниям к постановке исследований для обоснования санитарных стандартов вредных веществ в воздухе рабочей зоны (24).
В настоящих МУ использована система прогнозирования параметров токсикометрии и безопасных уровней воздействия, основанная на ретроспективном корреляционно-регрессионном анализе данных по ЛС и промышленным аэрозолям, имеющим законодательно утвержденные гигиенические нормативы (11, 49, 50, 59).
2.2.1. Исследование острой токсичности. Исследования проводятся на 2 — 3 видах лабораторных животных при пероральном, внутрибрюшинном и ингаляционном поступлении. При наличии литературных данных о параметрах острой токсичности целесообразно воспроизвести ранее полученные значения и на одном виде животных (9).
В случае известных величин (в мг/кг) при каком-то одном пути введения, выбор доз ЛС для установления при другом пути можно осуществлять с помощью следующих уравнений регрессии:
Для оценки опасности острого ингаляционного отравления можно использовать уравнения, основанные на связи между среднесмертельными концентрациями при ингаляционном поступлении ( ) и в/ж и в/б.
В представленных уравнениях и ниже по тексту при одновременном наличии смертельных доз и пороговых концентраций для мышей и крыс в качестве исходных взяты величины для наиболее чувствительного вида животных.
2.2.2. Установление порога острого действия. Для планирования исследований ингаляционной токсичности ЛС могут использоваться уравнения, полученные при анализе связей между порогами острого действия при ингаляционном воздействии (в ) и при внутрибрюшинном и пероральном поступлении:
Исследования, как правило, проводятся при ингаляционном пути поступления. При сравнительном изучении ЛС, сходных по своей фармакологической активности с ранее нормированными в воздухе рабочей зоны препаратами, допустимо использование перорального или парентерального пути введения.
Условия проведения экспериментов должны соответствовать действующим нормативно-методическим указаниям (24, 25, 26, 44, 45). При выборе адекватных методов и тестов для токсикологического исследования и обоснования пороговых уровней целесообразно учитывать особенности нормирования ЛС (раздел 1.2). При этом необходимо различать методы интегральные, отражающие общетоксическое действие на органы и системы, и специфические методы, обусловленные фармакологическим и побочным действием ЛС.
Вместе с тем при исследовании ЛС разделение методов на интегральные и специфические весьма условно. В каждом отдельном случае интегральный показатель может перейти в разряд специфических, например, масса тела при изучении анаболиков и некоторых психотропных ЛС; уровень ректальной температуры при исследовании психотропных, тиреотропных и йодсодержащих средств и т.д. является специфическим показателем. Важно в пределах доступного, но не в ущерб ценности обоснования того или иного токсикологического параметра, оценить функциональное состояние органов и систем с использованием адекватных патогенетических обусловленных методов.
Оценку состояния организма подопытных животных необходимо проводить в динамике. Оценка интегральных и специфических показателей позволяет установить , и . Далее в расчетных уравнениях для простоты написания используется обозначение только .
ГАРАНТ:
Нумерация разделов приводится в соответствии с источником
2.2.2.3. При выборе уровня острого ингаляционного воздействия следует ориентироваться на величину МСТД для человека (в г):
Если на уровне концентрации изменения у подопытных животных не выявляются, то испытание более высоких концентраций аэрозоля ЛС нецелесообразно (28).
2.2.2.4. Исследования пульмонотоксического и фиброгенного действия осуществляется в соответствии с принципами и методами, изложенными в (28). В частности, эти исследования необходимы при изучении субстанций ЛС и сложных лекарственных форм, содержащих металлы и минеральные компоненты.
2.2.2.5. Оценку состояния организма подопытных животных необходимо проводить в динамике с учетом скорости и стойкости реакции. При наличии данных о токсико/фармакокинетике ЛС или его метаболита обследование животных целесообразно проводить в момент соответствующий максимальной концентрации химического соединения в исследуемом биосубстрате, а также в период снижения концентрации в 2 раза. Общие подходы к оценке зависимости биологического эффекта от содержания исследуемого вещества в биосубстратах изложены в методических рекомендациях (41).
2.2.2.6. Для выявления избирательности фармакологического действия ЛС и установления порогового эффекта рекомендуется использование методических приемов с применением известных фармакологических веществ в качестве нагрузок, перечень которых для основных групп ЛС (психотропные, сердечно-сосудистые и др.) представлен в приложениях 3 и 4. Влияние указанных фармакологических веществ на центральную нервную систему (снотворные, стимуляторы медиаторных процессов, катехоламины и др.), сердечно-сосудистую и другие регуляторные системы широко используются в фармакологическом скрининге (3, 10, 16, 17).
Критериями оценки для выявления фармакологических и/или патогенетических эффектов при применении нагрузочных тестов могут служить количественная оценка поведенческих и вегетативных проявлений по степени их выраженности, продолжительность и скорость восстановления в сравнении с реакцией контрольных животных на идентичное воздействие.
ЛС, используемые в качестве нагрузок, вводятся, как правило, в опытах на мышах и крысах внутрибрюшинно за 45 мин до основного эксперимента с последующей регистрацией длительности и выраженности вызываемых эффектов: гексеналовый сон (80 — 100 мг/кг); апоморфиновая и фенаминовая стереотипия (2 и 6 мг/кг соответственно); резерпиновый птоз и гипотермия (2 мг/кг); ареколиновый гиперкинез (25 мг/кг); никотиновый тремор (7 мг/кг); длительность жизни и наличие судорог у животных, получивших коразол (150 мг/кг); наличие судорог и гибель животных после максимального электрошока (50 мВ; 0,2 с, 50 ГЦ) по методу Суинъярда.
В случае взаимодействия с резерпином последний вводится за 4 часа до эксперимента, затем животные получают испытуемое вещество и через 45 минут оценивают изменение температуры, птоз и снижение двигательной активности (3, 18). Так, например, наиболее важные для группы нейролептиков эффекты — каталепсия, блокада апоморфиновой и фенаминовой стереотипии, гипотермия обусловлены их основным дофаминоблокирующим действием на молекулярном уровне и характеризует антипсихотические свойства.
Несмотря на кажущуюся простоту набора тестов, они четко отражают основной механизм и характерный спектр действия фармакологических групп веществ, перечисленных в приложениях 3 и 4, и позволяют получить информацию о характере испытуемого вещества, установить пороговые дозы и концентрации по влиянию на широкий спектр психотропной, противосудорожной и других видов активности, включая центральные нейромедиаторные системы (норадренергическую, холинергическую, дофаминергическую, серотонинергическую и ГАМК-эргическую).
Рекомендуемые модели фармакологических нагрузок могут быть использованы как при однократных, так и повторных воздействиях при условии выведения этих групп животных из последующего эксперимента.
2.2.3. Изучение кумулятивных свойств и особенностей биологического действия ЛС в подостром эксперименте. Для оценки кумулятивного действия по летальному эффекту рекомендуется использовать общепринятые в практике промышленной токсикологии тест субхронической токсичности Лима и соавт. в модификации К.К. Сидорова и метод Ю.С. Кагана и В.В. Станкевича с ежедневным введением . При необходимости специального изучения кумулятивных свойств вещества, в зависимости от величины вводимой дозы, желательно проведение эксперимента с введением крысам 2 — 3-х доз исследуемого ЛС ( ) (48).
2.2.4. Изучение сенсибилизирующего и иммунотоксического действия ЛС. Оценка сенсибилизирующего действия ЛС осуществляется в соответствии с требованиями к постановке исследований по обоснованию предельно допустимых концентраций промышленных химических аллергенов в воздухе рабочей зоны и атмосферы (40) и рекомендациями по оценке аллергенных свойств фармакологических средств.
Поскольку в естественных условиях чаще наблюдается комбинированная сенсибилизация по сравнению с селективной формой, для более полной характеристики аллергенной активности ЛС рекомендуется проведение дополнительных исследований:
— активной и пассивной кожной анафилаксии;
— дегрануляции тучных клеток;
— специфического торможения миграции макрофагов;
— секреции гистамина из клеток-мишеней (тучные клетки, базофилы);
— титра комплемента в сыворотке крови по 50% гемолизу;
— циркулирующих иммунных комплексов в тканях и сыворотке крови.
При исследовании ЛС, обладающих иммуномодулирующим действием, а также соединений, которые по своему химическому строению сходны с веществами, способными активно реагировать с молекулярными структурами и клеточными элементами иммунной системы, проводится оценка их иммунотоксических свойств. При проведении исследований необходимо руководствоваться методическими рекомендациями по экспериментальному изучению иммунотоксических свойств химических факторов окружающей среды (47).
Кроме того, рекомендуется руководствоваться положениями, изложенными в методических материалах по экспериментальному (фармакологическому) и клиническому испытанию иммуномодулирующего действия фармакологических средств и методических рекомендациях по оценке иммунотоксических свойств фармакологических средств.
Существенную помощь в решении вопроса о необходимости определения порога иммунотоксической активности можно получить из литературных сведений о ЛС и его аналогах, а также на основании данных визуального патоморфологического обследования органов иммуногенеза (селезенка, лимфоузлы, тимус), показателей лейкограммы (процентное и абсолютное содержание лимфоцитов, лейкоцитов, анализ лейкоформулы) экспериментальных животных в хроническом опыте при определении кумулятивных свойств лекарств и определении сенсибилизирующей активности.
Установление пороговой и подпороговой концентрации ЛС при ингаляционном воздействии осуществляется в подостром месячном эксперименте в условиях затравки животных 5 раз в неделю по 4 часа. Обследование животных проводят на 1, 2 и 4 неделе с момента эксперимента. Целесообразно изучение обратимости наблюдаемых изменений в восстановительном периоде после прекращения затравки.
Модуляцию клеточного иммунитета оценивают по относительному и абсолютному числу Т-лимфоцитов, выраженности реакции гиперчувствительности замедленного типа — ГЗТ, реакции «трансплантат против хозяина» — РТПХ и др. Оценку выраженности антителогенеза осуществляют путем определения абсолютного и относительного числа В-лимфоцитов, антителообразующих клеток селезенки (АОК) и агглютининов к эритроцитам барана.
Информативными показателями неспецифической резистентности организма являются исследования гемолитической активности комплемента, фагоцитарной активности лейкоцитов (определение % фагоцитов, фагоцитарного числа, количества активных фагоцитов, абсолютного фагоцитарного показателя, индекса завершенности фагоцитоза) и общей окислительно-восстановительной активности нейтрофилов в тесте восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест).
Для выяснения патогенетических механизмов нарушения функционирования иммунной системы дополнительно рекомендуется оценка главных ее составляющих, включая распознавание, активацию, пролиферацию, дифференцировку и регуляцию.
Опасность иммунотоксического действия оценивается с учетом соотношения между пороговой концентрацией ( ), установленной по влиянию веществ на систему иммунитета, и порогом хронического общетоксического действия. В том случае, если , вещество регламентируется по иммунотоксическому действию (ПДК принимается на уровне недействующей концентрации). Если в результате эксперимента , уровень ПДК устанавливается без учета иммунотоксических свойств.
При ускоренном обосновании ПДК или установлении ОБУВ проводится сопоставление и недействующей концентрации с величиной гигиенического норматива, рассчитанной по параметрам общетоксического действия. Если расчетное значение ОБУВ находится на уровне или выше недействующей концентрации по иммунотоксическому действию, нормирование вещества осуществляется с учетом его иммуномоделирующих свойств. При более высоких значениях по сравнению с расчетной величиной ОБУВ уровень гигиенического норматива устанавливается по общетоксическому действию вещества.
2.2.5. Оценка местного раздражающего и кожно-резорбтивного действия. Изучение местного раздражающего действия на кожу и слизистые оболочки и резорбции веществ через неповрежденную кожу проводится в соответствии с МУ (37). Для этих целей рекомендуется также использование метода Драйза (63).
При наличии у исследуемого вещества местного раздражающего или кожно-резорбтивного действия вносится пометка «требуется специальная защита кожи и глаз».
2.2.6. Обоснование ориентировочных безопасных уровней воздействия ЛС. При обосновании ОБУВ ЛС целесообразно провести предварительно расчет величины порога хронического ингаляционного действия ( в ) с использованием экспериментально установленных параметров токсикометрии ( в/ж, КВР, , , ), и суточных терапевтических доз (МСТД и ВСТД в г):
Источник
