- Донник лекарственный (Melilotus officinalis)
- Оглавление
- Формула цветка
- В медицине
- В других областях
- Классификация
- Ботаническое описание
- Распространение
- Заготовка сырья
- Химический состав
- Фармакологические свойства
- Применение в народной медицине
- Историческая справка
- Литература
- Восстановление легких после коронавируса
- Легкие после COVID-19
- ФС.2.5.0011.15 Донника трава
- ФС.2.5.0011.15 Донника трава
- ПОДЛИННОСТЬ
- Внешние признаки
- Тонкослойная хроматография
- Высокоэффективная жидкостная хроматография
- ИСПЫТАНИЯ
- Влажность
- Зола общая
- Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте
- Измельченность сырья
- Посторонние примеси
- Тяжелые металлы
- Радионуклиды
- Остаточные количества пестицидов
- Микробиологическая чистота
- Количественное определение
Донник лекарственный (Melilotus officinalis)
Двухлетнее травянистое растение с высокими ветвистыми стеблями и крупными желтыми цветками. Является лечебным сырьем для приготовления противосудорожных препаратов, имеет широкое применение в народной медицине в качестве антисептического, болеутоляющего, ранозаживляющего, отхаркивающего средства.
Оглавление
Формула цветка
В медицине
В научной медицине препараты (пластырь донниковый) из травы донника применяется наружно – накладывают на абсцессы и фурункулы в качестве наружного смягчающего и отвлекающего средства. Донник лекарственный применяют также для ванн при кожных заболеваниях. Кумарин, содержащийся в траве донника лекарственного действует на центральную нервную систему угнетающе, обладает противосудорожным и наркотическим действием. У больных лейкопенией на почве лучевой терапии кумарин эффективен, увеличивает количество лейкоцитов, и в меньшей степени – лимфоцитов.
Трава донника входит в состав сборов, используемых для лечения ревматизма и герпеса, а также в сбор Успокоительный № 3, обладающий седативным и спазмолитическим свойствами. Кроме того, входит в состав препаратов БАД «Бальзам монастырский Даниловский», геля «Венокорсет».
Противопоказания и побочные действия
Следует учитывать, что кумарин в больших дозах вызывает тошноту, рвоту, головную боль, оказывает парализующее действие на гладкую мускулатуру.
В других областях
Применяется как ароматическое средство в пищевой, кондитерской, табачной и косметической промышленности. Является хорошим медоносом и ценным кормовыми растением. Используется в качестве сидерата для обогащения почвы азотом.
Классификация
Донник лекарственный (лат. Melilótus officinális L.) – принадлежит одному из крупнейших семейств бобовые, или мотыльковые (лат. Fabaceae, или Papilionaceae). Семейство объединяет более 9000 видов цветковых растений, распространённых широко во всех континентах с умеренным климатом.
Ботаническое описание
Донник лекарственный – двулетнее травянистое растение со стержневым беловатым корнем и прямостоячими ветвистыми, ребристыми стеблями, опушенными в верхней части, высотой от 50 до 100 и более см. Листья очередные, черешковые, тройчатые с заострёнными ланцетовидными прилистниками. Листочки с мелкопильчатым краем, продолговато-овальные. Цветки мелкие, 5-7 мм длины, собраны в поникающие пазушные кисти, имеющие длинные цветоносы. Венчик желтый, зигоморфный (неправильный) мотылькового типа. Формула цветка донника — Ч3,2Л1,2,(2)Т(5+4)1П1. Плод – мелкий, голый, овальный, сероватый, поперечно-морщинистый одно-двусемянной боб, с шиловидным носиком. Семена зеленовато-желтые, длиной 1,8-2,2 мм. Цветет в июне-сентябре. Семена созревают начиная с августа месяца.
Распространение
Встречается по всей Европейской части России, кроме Крайнего Севера. Растет повсеместно на различных типах лугов, по лесным опушкам, обочинах дорог, пустырях, реже как сорное в посевах и полях.
Заготовка сырья
Заготавливают траву донника лекарственного в фазе цветения, срезая верхушки и боковые побеги длиной до 30 см. Грубые и толстые стебли удаляют, потому что они практически не содержат биологически активные вещества. Сушат в помещении с хорошей вентиляцией или в сушилках при температуре 40̊ С. Высушенную траву обмолачивают, крупные стебли отбрасывают. Лекарственное сырье состоит из смеси цветков, листьев, тонких стеблей и незначительного количества плодов, с характерным кумариновым запахом свежего сена. Срок хранения лекарственного сырья до 2 лет. Недопустимые примеси: донник белый (Melilotus albus Ders.), донник зубчатый (Melilotus dentatus Pers.).
Химический состав
В траве лекарственного растения донник содержатся кумарины и их производные (0,4-0,9%: кумарин, дикумарол, дигидрокумарин, гликозид мелилотозид), флавоноиды (робинин, фловин, кемпферол и его производные), мелилотин, эфирное масло (0,01%), полисахариды (слизи), белок (17,6%), сапонины, производные пурина (аллантоин), фенолкарбоновые кислоты (гидроксикоричная, кумаровая, мелилотовая), фенольные тритерпеновые соединения, углеводные соединения, азотистые основания, аминокислоты, дубильные вещества, витамин С (до 389 мг%), витамин Е (более 45 мг%), каротин (до 84 мг%), жироподобные вещества (до 4,3%), макро- и микроэлементы (накапливает молибден, селен). Приятный запах растению придают кумарин и мелилотин. В семенах содержатся жирные кислоты (пальмитиновая, стеариновая, олеиновая, линолевая, линоленовая, арахиновая, бегеновая, лигноцериновая), также в общедоступных источниках информации есть указания на образование дикумарина при определенных условиях хранения.
Фармакологические свойства
Основным действующим веществом препаратов донника лекарственного считается кумарин, который угнетает центральную нервную систему, обладает противосудоржным и наркотическим действием, в больших дозах ядовит. Также содержится дикумарол, который является антикоагулянтом непрямого действия, препятствует свертыванию крови и образованию тромбов. Установлено наличие у травы донника антигипоксической, антиишемической и других видов кардиотропной активности. Препараты донника лекарственного применяют как сердечно-сосудистое средство. Настой травы донника оказывает отхаркивающее, противовоспалительное действие.
Применение в народной медицине
В народной медицине донник лекарственный находит разнообразные способы применения. Внутрь, в виде отвара при опухолях суставов, при болезненных месячных, диспареунии, при головной боли, в период лактации в качестве молокогонного средства, а также при воспалении грудных желез. Наружно накладывают компресс при гнойных ранах и язвах, фурункулах, ревматизме, принимают ванны при воспалении яичников.
Историческая справка
Литература
1. Блинова К. Ф. и др. Ботанико-фармакогностический словарь: Справ. пособие / Под ред. К. Ф. Блиновой, Г. П. Яковлева. — М.: Высш. шк., 1990. — С. 187. — ISBN 5-06-000085-0.
2. Государственная Фармакопея СССР. Одиннадцатое издание. Выпуск 1 (1987), выпуск 2 (1990).
3. Государственный Реестр лекарственных средств. Москва 2004.
4. Ильина Т.А. Лекарственные растения России (Иллюстрированная энциклопедия). – М., «ЭКСМО» 2006.
5. Замятина Н.Г. Лекарственные растения. Энциклопедия природы России. М. 1998.
6. Компонентный состав биологически активных веществ донника лекарственного (желтого). А.А. Ефремов, И.Д. Зыкова, М.М. Целуковская / Химия растительного сырья. №3. 2012. С. 111-114.
7. Кучина Н.Л. Лекарственные растения средней полосы Европейской части России — М.: Планета, 1992. – 157 с.
8. Лекарственные растения: Справочное пособие. / Н.И. Гринкевич, И.А. Баландина, В.А. Ермакова и др.; Под ред. Н.И. Гринкевич – М.: Высшая школа, 1991. – 398 с.
9. Лекарственные растения государственной фармакопеи. Фармакогнозия. (Под ред. И.А. Самылиной, В.А. Северцева). – М., «АМНИ», 1999.
10. Лекарственное растительное сырье. Фармакогнозия: Учеб. пособие / Под ред. Г.П. Яковлева и К.Ф. Блиновой. – СПб.: Спец. Лит, 2004. – 765 с.
11. Лекарственные растения в природном комплексе. Хлебцова Е.Б., Пучков М.Ю., Власенко М.В. и др. Астрахань: Изд. Сорокин Роман Васильевич, 2014. 266 с.
12. Лекарственные растения (дикорастущие). Под ред. д.ф.н., проф. А.Ф. Гаммермана и акад. АН СССР И.Д. Юркевича. Минск: Изд. «Наука и техника», 1967. 392 с.
13. Лесиовская Е.Е., Пастушенков Л.В. «Фармакотерапия с основами фитотерапии.» Учебное пособие. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003.
14. Мазнев В.И. Энциклопедия лекарственных растений -.М.: Мартин. 2004. – 496 с.
15. Маннфрид Палов. «Энциклопедия лекарственных растений». Под ред. канд. биол. наук И.А. Губанова. Москва, «Мир», 1998.
16. Машковский М.Д. «Лекарственные средства». В 2 т. — М., ООО «Издательство Новая Волна», 2000.
17. Новиков В. С., Губанов И. А. Род Ель (Picea) // Популярный атлас-определитель. Дикорастущие растения. — 5-е изд., стереотип. — М.: Дрофа, 2008. — С. 65—66. — 415 с. — (Популярный атлас-определитель). — 5000 экз. — ISBN 978-5-358-05146-1. — УДК 58(084.4)
18. Носов А.М. Лекарственные растения в официнальной и народной медицины. М.: Изд-во Эксмо, 2005. – 800 с.
19. Природные кумарины: методы выделения и анализа (обзор). А.В. Ложкин, Е.И. Саканян / Химико-фармацевтический журнал, Т.40, №6, 2006. С. 47-56.
20. Растения для нас. Справочное пособие / Под ред. Г.П. Яковлева, К.Ф. Блиновой. – Изд-во «Учебная книга», 1996. – 654 с.
21. Растительные ресурсы России: Дикорастущие цветковые растения, их компонентный состав и биологическая активность. Под редакцией А.Л. Буданцева. Т.5. М.: Товарищество научных изданий КМК, 2013. – 312 с.
22. Соколов С. Я. Лекарственные растения. — Алма-Ата: Медицина, 1991. — С. 118. — ISBN 5-615-00780-X.
23. Соколов С.Я., Замотаев И.П. Справочник по лекарственным растениям (фитотерапия). – М.: VITA, 1993.
24. Турова А.Д. «Лекарственные растения СССР и их применение». Москва. «Медицина». 1974.
25. «Фитотерапия с основами клинической фармакологии» под ред. В.Г. Кукеса. – М.:Медицина, 1999.
26. Чиков П.С. «Лекарственные растения» М.: Медицина, 2002.
Источник
Восстановление легких после коронавируса
Восстанавливаются ли легкие после COVID-19? Да. Но нужно не пропустить сроки реабилитации и серьёзно отнестись к рекомендациям врача.
Новая коронавирусная инфекция, вызванная SARS-CoV-2, недостаточно изучена, однако ясно, что она наносит вред всем органам и тканям человека. Вирус проникает в организм через слизистые оболочки носа, глаз, глотки. Первые симптомы появляются на 2-14 день. Обычно это повышение температуры выше 37.5 градусов Цельсия, насморк, потеря обоняния, сухой кашель, послабление стула, слабость и головная боль. На 6–10 сутки от момента появления первых симптомов могут начать беспокоить одышка, боль в груди, усиление кашля. Это тревожные симптомы, говорящие о поражении легких и требующие проведения дополнительного обследования: компьютерной томографии легких, измерения насыщения крови кислородом (сатурации).
Легкие после COVID-19
Попадая в организм человека через слизистые оболочки дыхательных путей SARS-CoV-2 вызывает мощнейшую воспалительную реакцию. Активируются иммунные клетки, вырабатывается колоссальное количество воспалительных веществ (воспалительных цитокинов). Интенсивность этой реакции скорее всего обусловлена генетически. Именно интенсивностью воспалительной реакции и определяется тяжесть поражения легочной ткани по данным исследований. В легочной ткани поражение при COVID-19 обусловлено как поражением самих альвеол (в которых происходит газообмен и кровь насыщается кислородом из воздуха) нашими собственными иммунными клетками так и поражением легочных сосудов, оплетающих альвеолы. Степень поражения легких можно определить при помощи КТ (компьютерной томографии).
Таблица 1. Поражение лёгких при COVID-19
Источник
ФС.2.5.0011.15 Донника трава
Содержимое (Table of Contents)
ФС.2.5.0011.15 Донника трава
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ
Донника трава ФС.2.5.0011.15
Meliloti herba Вводится впервые
Собранная в фазу цветения, высушенная трава дикорастущих и культивируемых двулетних травянистых растений донника лекарственного – Melilotus officinalis (L.) Desr. и донника рослого – Melilotus altissimus Thuil., сем. бобовых – Fabaceae.
ПОДЛИННОСТЬ
Внешние признаки
Цельное сырье. Цельные или частично измельченные облиственные цветущие верхушки и боковые веточки с ребристым стеблем диаметром до 3 мм и длиной до 30 см. Прилистники ланцетные или шиловидные, почти всегда цельнокрайние, редко у самых нижних листочков с 1 – 2 зубчиками. Нижние листья обратнояйцевидные, верхние – продолговатые или ланцетные, по краю с обеих сторон с 10 – 13 неровными зубчиками у донника лекарственного и с 8 – 20 зубчиками у донника рослого.
Цветки мотыльковые мелкие длиной от 5 до 7 мм. Чашечка колокольчатая пятизубчатая, остающаяся при плоде, голая у донника лекарственного и опушенная у донника рослого. Иногда встречаются в незначительном количестве мелкие незрелые плоды – бобы длиной от 3 до 5 мм, неясносетчатые или поперечно-морщинистые, голые или покрытые редкими волосками. Семя одно, реже два.
Цвет стеблей зеленый, желтовато-зеленый, зеленовато-желтый, на изломе – серовато- или желто-белый, листьев и плодов – зеленый, желтовато-зеленый, зеленовато-желтый, цветков и бутонов — желтый. Запах ароматный (кумариновый). Вкус водного извлечения горьковатый или солоновато-горьковатый.
Измельченное сырье. При рассмотрении измельченного сырья под лупой (10×) или стереомикроскопом (16×) видны кусочки листьев, стеблей и соцветий различной формы, отдельные цветки, бутоны, плоды и их части, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 5 мм. Цвет стеблей снаружи зеленый, желтовато-зеленый, зеленовато-желтый, на изломе – серовато- или желтовато-белый, листьев и плодов — зеленый, желтовато-зеленый, зеленовато-желтый с коричневыми вкраплениями бобов, цветков и бутонов — желтый. Запах ароматный (кумариновый). Вкус водного извлечения горьковатый или солоновато-горьковатый.
Порошок. При рассмотрении порошка под лупой (10×) или стереомикроскопом (16×) видны кусочки листьев и стеблей различной формы, отдельные бутоны, части цветков и плодов, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. Цвет серовато-зеленый, зеленовато-желтый с серовато- или желтовато-белыми, желтыми, темно-зелеными, коричневыми вкраплениями. Запах ароматный (кумариновый). Вкус водного извлечения горьковатый или солоновато-горьковатый.
Микроскопические признаки
Цельное сырье, измельченное сырье. При рассмотрении листа с поверхности видны изодиаметрические клетки верхнего эпидермиса со слабоизвилистыми стенками, нижнего – с более извилистыми стенками. Складчатая кутикула – на верхушках зубчиков. Устьица овальные, окружены 2 – 5 околоустьичными клетками (аномоцитный тип), расположены на верхнем и нижнем эпидермисе. Встречаются волоски 2 типов: простые одноклеточные, тонкостенные и толстостенные с заостренным концом и бородавчатой кутикулой; головчатые волоски с овальной многоклеточной головкой на короткой 1–2-клеточной ножке, вокруг места прикрепления волоска клетки эпидермиса образуют розетку. Жилки листа окружены кристаллоносной обкладкой.
При рассмотрении лепестков с поверхности видны клетки эпидермиса с сосочковидными выростами. Клетки эпидермиса чашелистиков и цветоножек продольно вытянутые и имеют прямые или слабоизвилистые стенки, иногда со складчатой кутикулой. Устьица аномоцитного типа, расположенные с наружной стороны чашелистиков. На поверхности чашелистиков и цветоножек имеются многочисленные простые одноклеточные волоски и головчатые волоски и их фрагменты. Жилки чашелистиков окружены кристаллоносной обкладкой.
При рассмотрении давленого препарата стебля видны продольно вытянутые клетки эпидермиса с прямыми стенками, устьица аномоцитного типа, редкие, на поверхности встречаются волоски, характерные для данного сырья, но часто крупнее. Паренхима состоит из клеток овальной или вытянутой формы, встречаются механические волокна, кристаллы оксалата кальция, сосуды спирального типа.
Порошок. При рассмотрении микропрепаратов видны фрагменты эпидермиса с клетками со слабоизвилистыми и извилистыми стенками, устьицами овальными, окруженными 2 – 5 околоустьичными клетками (аномоцитный тип). У фрагментов эпидермиса лепестков наблюдаются сосочковидные выросты. На некоторых фрагментах листа и чашелистиков встречаются характерные волоски: простые одноклеточные, тонкостенные и толстостенные с заостренным концом и бородавчатой кутикулой, вокруг места прикрепления волоска клетки эпидермиса образуют розетку; головчатые волоски с овальной многоклеточной головкой на короткой 1–2-клеточной ножке и их фрагменты. Фрагменты мезофилла включают жилки с кристаллоносной обкладкой. Проводящие пучки представлены спиральными сосудами.
Рисунок – Донника трава.
» data-image-caption=»» data-medium-file=»https://i0.wp.com/pharmacopoeia.ru/wp-content/uploads/2016/09/Risunok-Donnika-trava..png?fit=297%2C300&ssl=1″ data-large-file=»https://i0.wp.com/pharmacopoeia.ru/wp-content/uploads/2016/09/Risunok-Donnika-trava..png?fit=700%2C708&ssl=1″ loading=»lazy» src=»https://i1.wp.com/pharmacopoeia.ru/wp-content/uploads/2016/09/Risunok-Donnika-trava.-297×300.png?resize=527%2C532″ alt=» Рисунок – Донника трава.» width=»527″ height=»532″ srcset=»https://i0.wp.com/pharmacopoeia.ru/wp-content/uploads/2016/09/Risunok-Donnika-trava..png?resize=297%2C300&ssl=1 297w, https://i0.wp.com/pharmacopoeia.ru/wp-content/uploads/2016/09/Risunok-Donnika-trava..png?resize=150%2C150&ssl=1 150w, https://i0.wp.com/pharmacopoeia.ru/wp-content/uploads/2016/09/Risunok-Donnika-trava..png?resize=768%2C777&ssl=1 768w, https://i0.wp.com/pharmacopoeia.ru/wp-content/uploads/2016/09/Risunok-Donnika-trava..png?resize=660%2C668&ssl=1 660w, https://i0.wp.com/pharmacopoeia.ru/wp-content/uploads/2016/09/Risunok-Donnika-trava..png?w=1382&ssl=1 1382w» sizes=»(max-width: 527px) 100vw, 527px» data-recalc-dims=»1″/>
Рисунок – Донника трава.
1 – фрагмент эпидермиса стебля с головчатым волоском (400×);
2 – клетки нижнего эпидермиса листа с извилистыми стенками, устьица аномоцитного типа (400×); 3 – фрагмент лепестка (наружная сторона): клетки эпидермиса с сосочковидными выростами (400×); 4 – простой одноклеточный бородавчатый волосок (200×); 5 – фрагмент листа: клетки эпидермиса со складчатой кутикулой на зубчатом крае листа (200×); 6 – головчатый волосок, радиально расположенные клетки эпидермиса в месте прикрепления волоска, кристаллоносная обкладка вдоль жилки (200×).
Определение основных биологически активных веществ
Тонкослойная хроматография
Раствор для детектирования. Калия гидроксида 2 М раствор спиртовой.
Около 1,8 г измельченного сырья до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 10 мл спирта 96 % и нагревают с обратным холодильником на кипящей водяной бане в течение 30 мин. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через бумажный фильтр (испытуемый раствор).
На линию старта высокоэффективной хроматографической пластинки со слоем силикагеля на алюминиевой подложке размером 10 × 10 см наносят 20 мкл испытуемого раствора и 20 мкл раствора стандартного образца (СО) кумарина (см. раздел «Количественное определение» раствор А СО кумарина). Пластинку с нанесенными пробами сушат при комнатной температуре, помещают в камеру предварительно насыщенную в течение не менее 30 мин смесью растворителей уксусная кислота разведенная 12 % – эфир – толуол (10:50:50), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 – 90 % длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, обрабатывают раствором для детектирования и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.
На хроматограмме раствора СО кумарина должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией зеленого, голубовато-зеленого или желтовато-зеленного цвета.
На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться зоны адсорбции с флуоресценцией: зеленого, голубовато-зеленого или желтовато-зеленого цвета на уровне зоны на хроматограмме раствора СО кумарина, зона сине-голубого цвета ниже зоны кумарина; возможно обнаружение зоны адсорбции с флуоресценцией зеленого, голубовато-зеленого или желтовато-зеленого цвета ниже зоны кумарина; допускается обнаружение других зон адсорбции.
Высокоэффективная жидкостная хроматография
Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора, полученного для количественного определения, должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме раствора СО кумарина (см. раздел «Количественное определение»).
ИСПЫТАНИЯ
Влажность
Цельное сырье, измельченное сырье, порошок – не более 14 %.
Зола общая
Цельное сырье, измельченное сырье, порошок – не более 10 %.
Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте
Цельное сырье, измельченное сырье, порошок – не более 2 %.
Измельченность сырья
Цельное сырье: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм, — не более 5 %. Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 5 мм, — не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, — не более 5 %. Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, — не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, — не более 5 %.
Посторонние примеси
Стебли диаметром свыше 3 мм. Цельное сырье – не более 2 %.
Сырье, изменившее окраску (потемневшее и почерневшее). Цельное сырье, измельченное сырье – не более 2 %.
Органическая примесь. Цельное сырье, измельченное сырье – не более 1 %.
Минеральная примесь. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок – не более 0,5 %.
Тяжелые металлы
Радионуклиды
В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».
Остаточные количества пестицидов
Микробиологическая чистота
Количественное определение
Цельное сырье, измельченное сырье, порошок: кумарина — не менее 0,3 %.
Раствор СО кумарина. Около 0,025 г (точная навеска) СО кумарина растворяют в спирте 96 % в мерной колбе вместимостью 50 мл, доводят объем раствора спиртом 96 % до метки и перемешивают (раствор А СО кумарина). Срок годности раствора не более 30 сут при хранении в хорошо укупоренной упаковке, в прохладном защищенном от света месте.
1,0 мл раствора А СО кумарина переносят в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора спиртом 96 % до метки и перемешивают (раствор Б СО кумарина). Раствор Б используют свежеприготовленным.
Проверка пригодность хроматографической системы.
Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующие условия:
- фактор асимметрии пика (Т) кумарина не менее 0,8 и не более 1,5;
- эффективность хроматографической колонки, рассчитанная по пику кумарина, – не менее 1500 теоретических тарелок;
- относительное стандартное отклонение площади пика кумарина – не более 3 %.
Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. Около 1,8 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл спирта 96 %, нагревают с обратным холодильником на кипящей водяной бане в течение 30 мин. После охлаждения надосадочную жидкость фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл. Извлечение повторяют дважды, используя 30 и 25 мл спирта 96 % соответственно, при этом при последнем извлечении бумажный фильтр переносят в колбу для экстракции. Объем извлечения в мерной колбе доводят до метки спиртом 96 %, одновременно промывая колбу, в которой проводили экстракцию, и перемешивают. Полученное извлечение фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 мкм, отбрасывая первые 1 – 2 мл фильтрата (раствор А испытуемого раствора).
Условия хроматографирования
Колонка | 125 × 4,0 мм, эндкеппированный октадецилсилил (С18) силикагель для хроматографии, 5 мкм. |
Предколонка | 4 × 4 мм, эндкеппированный октадецилсилил (С18) силикагель для хроматографии, 5 мкм. |
Подвижная фаза | Ацетонитрила раствор 25 % в фосфорной кислоты растворе 0,3 %. Фосфорной кислоты раствор 0,3 %. 3,0 мл фосфорной кислоты концентрированной помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, доводят объем раствора водой для хроматографии до метки и перемешивают. Полученный раствор фильтруют и дегазируют. Срок годности раствора 30 сут при хранении в хорошо укупоренной упаковке, в прохладном защищенном от света месте. Ацетонитрила раствор 25 % в фосфорной кислоты растворе 0,3 %. 250 мл ацетонитрила для хроматографии помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, доводят до метки фосфорной кислоты раствором 0,3 % и перемешивают. Полученный раствор фильтруют и дегазируют. Срок годности раствора 7 сут при хранении в хорошо укупоренной упаковке, в прохладном защищенном от света месте. |
Скорость потока, мл/мин | 1 |
Температура колонки, о С | комнатная (20 ± 2) |
Детектор | диодная матрица или спектрофотометрический; длина волны 275 нм |
Объем вводимой пробы, мкл | 10 |
Время хроматографирования, мин | 12 |
Хроматографируют попеременно испытуемый раствор и раствор СО кумарина, получая не менее 3 хроматограмм. Результаты считаются достоверными, если выполняются требования теста «Проверка пригодности хроматографической системы». Расчет содержания кумарина, проводят методом внешнего стандарта.
Содержание кумарина в абсолютно сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:
S – площадь пика кумарина на хроматограмме раствора А испытуемого раствора;
Sо – площадь пика кумарина на хроматограмме раствора Б СО кумарина;
– навеска сырья, г;
Р – содержание основного вещества в СО кумарина, %;
Источник