Определение чистоты лекарственных средств
Основным принципом в требованиях к чистоте ЛС является отсутствие или ограничеснное содержание тех примесей, которые могут отрицательно влиять на физико-химические и фармакологические свойства.
Примеси, встречающиеся в ЛС, в зависимости от характера и свойств могут оказывать влияние на фармакологическое действие ЛС или не оказывают специфического действия, а их присутствие указывает на степень очистки ЛВ (например, примеси хлоридов, сульфатов).
В отличие от химических веществ, которые классифицируются в зависимости от степени чистоты как «чистые», «чистые для анализа» и «химически чистые», лекарственные вещества должны быть «фармакопейного качества». В частной статье на каждое ЛВ приведен перечень показателей, по которым устанавливают его чистоту. К таким показателям относятся рассмотренные нами ранее внешний вид, растворимость, температура плавления или кипения, а также такие показатели как прозрачность, цветность, рН, примеси других веществ и ионов, зола, влажность и др. Несоответствие ЛВ одному из предусмотренных НТД показателей указывает на изменение его качества, наличие или появление примесей в процессе хранения.
Для установления чистоты ЛВ используются химические, физические и физико-химические методы. В частности, для определения примесей химическими реакциями используются специфические и высокочувствительные реакции. Специфическими являются реакции, позволяющие обнаружить одни вещества в присутствии других.
Для установления примесей применяют безэталонный и эталонный методы.
Безэталонный метод. В случаях, когда в частной ФС на лекарственное вещество указано, что примесного вещества или иона «не должно быть», проводится испытание на это примесное вещество или ион. Так, в ЛВ «Натрия хлорид» должны отсутствовать ионы калия, поэтому раствор натрия хлорида в определенной концентрации не должен давать мути от прибавления раствора кислоты виннокаменной, что указывает на отсутствие недопустимой в этом препарате примеси иона калия (антагонист по фармакологическому действию). В воде очищенной не должно быть примесей ионов Cl — и Са 2+ ; реакция на эти ионы должна быть отрицательной.
Эталонный метод. Если предел содержания примесей дан в числовом выражении (например, в процентах), то используется эталонный метод. Например, содержание примеси хлоридов в препарате «Меди сульфат» по требованию частной ФС должно быть не более 0,005 %.
Для определения допустимого предела содержания примесей в ЛС проводят их количественную оценку с помощью соответствующих эталонных растворов – на цветность, мутность, примесные вещества и ионы.
Эталонные растворы содержат определенное количество примесного иона или примесного вещества. Их готовят из соответствующих веществ взятием навески с точностью до 0,001 г. Готовят растворы А (для длительного хранения) и из них – рабочие растворы Б и В путем разведения до нужной концентрации.
Относительная ошибка эталонного метода определения предела содержания примеси составляет ±10 %. Эталонный метод более точен, чем безэталонный, поэтому часто используется для нормирования содержания токсичных примесей ( примеси мышьяка, тяжелых металлов и др.).
Допустимое количество примесей в ЛВ может быть определено также путем титрования (например, количество HI в 10 %-ном спиртовом растворе йода определяют титрованием NaOH).
При испытании на чистоту должны соблюдаться требования ГФ, изложенные в общих замечаниях:
1. вода и реактивы должны быть свободны от ионов, на которые проводится испытание;
2. пробирки, в которых проводятся наблюдения, должны быть бесцветными и одинакового диаметра, чтобы столб жидкости был одинаковым в обеих пробирках;
3. добавление реактивов к испытуемому и эталонному растворам должно проводиться одновременно и в одинаковых количествах;
4. в случаях, когда в соответствующей статье ГФ указано, что в данной концентрации раствора не должно обнаруживаться той или иной примеси, поступают следующим образом: к испытуемому раствору прибавляют применяемые для каждой реакции, приведенные в статье реактивы, кроме основного, открывающего данную примесь. Раствор делят на 2 равные части и к одной из них прибавляют основной реактив. Оба раствора сравнивают. Между ними не должно быть различий;
5. окраску сравнивают при дневном отраженном свете на матово-белом фоне. Степень мутности определяют, сравнивая пробирки в проходящем свете на томном фоне.
Прозрачность и цветность
При оценке качества ряда ЛС ГФ предусматривает определение прозрачности или степени окраски их растворов. Растворы сравнивают (по ГФ ХI) с соответствующими эталонами мутности и цветности. Прозрачным считается раствор, в котором не наблюдается присутствие нерастворенных частиц, кроме единичных волокон. Раствор сравнивают невооруженным глазом с растворителем, взятым для приготовления данной жидкости при освещении матовой электрической лампой (40 Вт) на черном фоне. Бесцветными по ГФ ХI считают жидкости, не отличающиеся по цвету от воды, а при испытании иных растворов – от взятого растворителя. Испытание проводят, сравнивая жидкости при дневном отраженном свете на матово-белом фоне.
Приготовление эталонных растворов описано в общих статьях ГФ РК «Определение прозрачности и степени опалесценции жидкостей» и «Определение степени окраски жидкостей», в общих статьях ГФ ХI «Определение прозрачности и степени мутности жидкостей» и «Определение окраски жидкостей».
При определении степени окраски или мутности жидкости берут для сравнения в равных объемах (не менее 5 мл). Пробирки, в которых проводится определение, должны быть одинакового диаметра, стекло их должно быть одинаковой окраски.
Задание 1 – Определение прозрачности и степени мутности растворов лекарственных препаратов
Определение ведут по ГФ Х. Для проведения лабораторной работы подбирают из указанной ниже таблицы один препарат. Его раствор, приготовленный с соблюдением условий, указанных в соответствующей частной статье, должен быть прозрачным.
Таблица – Условия проведения испытаний на прозрачность, степень мутности и окраску растворов лекарственных препаратов
| Лекарственный препарат | Условия приготовления раствора | Прозрачность и степень мутности раствора | Окраска раствора |
| Кислота бензойная | 1,0 г растворяют в 10 мл раствора карбоната натрия | прозрачный | бесцветный |
| Кислота борная | 0,3 г растворяют в 10 мл воды или этанола | -“- | -“- |
| Кислота салициловая | 0,5 г растворяют в 10 мл этанола | -“- | -“- |
| Калия бромид | 1,0 г растворяют в 10 мл воды | -“- | -“- |
| Натрия бензоат | 1,0 г растворяют в 10 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды | -“- | -“- |
| Натрия бромид | 1,0 г растворяют в 10 мл воды | -“- | -“- |
| Натрия хлорид | 16,0 г растворяют в 160 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды | -“- | -“- |
| Натрия гидрокарбонат | 0,5 г растворяют в 10 мл воды | Не превышает эталон № 4 | -“- |
| Темисал | 1 г растворяют при нагревании до 40 о С в 20 мл свежепрокипяченной воды | Не превышает эталон № 3 | -“- |
| Фталазол | 0,2 г растворяют в смеси 1 мл 1 н раствора гидроксида натрия и 4 мл воды | прозрачный | Не интенсивнее эталона № 4 |
| Натрия п-аминосалицилат | 1,0 г растворяют в 10 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды | -“—“- | Не интенсивнее эталона № 5б |
Для определения степени мутности используют растворы темисала или натрия гидрокарбоната. Прозрачность и степень мутности исследуемого раствора и эталона наблюдают в проходящем свете. Для этого пробирки следует помещать в направлении источника света, опустив их ниже последнего, чтобы взгляд попадал на какую-либо темную поверхность.
Задание 2 – Определение окраски растворов лекарственных препаратов
Выполняют по методике ГФ ХI. Из таблицы, приведенной выше подбирают препарат, раствор которого должен быть бесцветным. Наблюдение сравниваемых пробирок с раствором проводят на белом фоне. Для определения окраски используют растворы фталазола или натрия п-аминосалицилата. Окраска этих растворов может быть идентична эталону или сходной с соответствующей окраской эталона. Она не должна превышать её по интенсивности, но может несколько отличаться по фону.
Результаты испытаний по заданиям 1 и 2 оформляют в виде таблицы:
| Препарат (латинское название и структурная формула | Результаты наблюдений | Соответствие требованиям ГФ Х (ГФ ХI) |
| ГФ Х | ГФ ХI |
Тема 5 – Определение кислотности, щелочности или рН растворов лекарственных препаратов (2 ч)
Цели:
· формирование знаний по определению кислотности, щелочности и рН растворов лекарственных препаратов;
· формирование навыков определения рН среды с помощью индикаторов и навыков работы на лабораторном иономере;
· формирование правовой компетенции – правила техники безопасности при работе с химическими реактивами и электроприборами;
· развитие коммуникативных навыков путем введения новых терминов и понятий;
· развитие мотивации у студентов в изучении вопросов темы.
Задачи обучения:
· раскрыть сущность методик определения кислотности, щелочности и рН растворов лекарственных препаратов;
· ознакомить с правилами техники безопасности при работе с химическими реактивами, применяемыми при выполнении практических заданий и техники безопасности при работе с иономером;
· демонстрировать технику работы на лабораторном иономере;
· ввести новые термины и понятия «кислотность», «щелочность», «водородный показатель», «индикатор», «буферная емкость» и др.
· развить умения выступать, описывать ситуацию, выделять главное.
Основные вопросы темы:
1. Протолитическая теория кислот и оснований.
2. Кислотно-основные индикаторы.
3. Определение рН колориметрическим и потенциометрическим методами.
Методы обучения и преподавания: применяется методика «Цепочка»: раскрытие темы занятия путем ответов на вопросы по цепочке: «Что?», «Кто?», «Когда?», «Как?», «Зачем?» и т.д.
Литература:
1. Государственная фармакопея Республики Казахстан. Т.1. – Алматы: Издат. дом «Жибек жолы», 2008. – С. 327-451.
2. Кулешова М.И. Пособие по качественному анализу лекарств. – М.: Медицина, 1980. – 208 с.
3. Лабораторные работы по фармацевтической химии: Учеб. пос. для фармац. ин-тов и фармац. фак. мед. ин-тов / Под ред. В.Г. Беликова. – М.: Высш. Школа, 1989. – С. 38-45.
- Государственная фармакопея СССР: Х изд. – М.: Медицина, 1969.
- Государственная фармакопея СССР: Х изд. – М.: Медицина, 1969. – С. 788.
- Государственная фармакопея СССР: ХI изд. – М.: Медицина, 1987. – С. 113.
Контроль вопросы, ситуационные задачи):
1. Можно ли по кислотности или щелочности раствора препарата судить о его доброкачественности и сделать заключение о подлинности?
2. Чем объясняется изменение окраски растворов кислотно-основных индикаторов при изменении рН среды?
3. В чем принципиальная разница индикаторного электрода и электрода сравнения?
4. Какова методика определения рН среды растворов колориметрическим методом?
5. В частной статье ГФ Х «Вода дистиллированная» указан интервал рН 5,0-6,8. Можно ли провести определение рН воды, используя индикатор? Какой индикатор можно использовать? Какова методика определения?
6. При колориметрическом определении рН среды по окраске испытуемого раствора с универсальным индикатором было установлено значение рН около 5. Какой индикатор следует избрать при определении рН раствора данного препарата?
7. Для определения по ГФ Х щелочности раствора калия ацетата добавляют раствор фенолфталеина. Появляется розовое окрашивание. Аналогично для определения щелочности растворов калия бромида также используют раствор фенолфталеина. Однако при этом раствор остается бесцветным. Чем это объяснить? Как изменяется химическая структура индикатора в первом т втором случаях?
8. Для установления рН раствора фенилсалицилата 1 г препарата взбалтывают в течение 5 мин с 50 мл воды и фильтруют. Фильтрат должен иметь нейтральную реакцию. Как это доказать?
Источник
Испытания на чистоту и допустимые пределы примесей
Государственная фармакопея СССР XI издания, вып. 1. С 165.
Для определения примесей в препаратах и приблизительной оценки их количества вводятся сравнения (колориметрические или нефелометрические) с эталонными растворами, устанавливающими предел содержания данной примеси.
1. Вода и все реактивы должны быть свободны от ионов, на содержание которых проводят испытания.
2. Пробирки, в которых проводят наблюдения, должны быть бесцветными и одинакового диаметра.
3. Навески для приготовления эталонных растворов отвешивают с точностью до 0,001 г.
4. Эталонные растворы Б и В готовят непосредственно перед применением.
5. Наблюдения мути и опалесценции растворов проводят в проходящем свете на темном фоне, а окраски — при дневном отраженном свете на матово-белом фоне.
6. Прибавление реактивов к испытуемому и эталонному растворам должно проводиться одновременно и в одинаковых количествах.
7. В случае, когда в соответствующей фармакопейной статье указано, что в данной концентрации раствора не должно обнаруживаться той или иной примеси, поступают следующим образом. К 10 мл испытуемого раствора прибавляют применяемые для каждой реакции реактивы, указанные в методике, кроме основного реактива, открывающего данную примесь. Затем раствор делят на две равные части: к одной из них прибавляют основной реактив и оба раствора сравнивают между собой. Между ними не должно быть заметной разницы.
Испытание на хлориды
Растворы хлоридов в зависимости от их концентрации образуют с раствором нитрата серебра белый творожистый осадок, белую муть или опалесценцию, не исчезающие от прибавления азотной кислоты и легко исчезающие от прибавления раствора аммиака.
Предельная чувствительность реакции — 0,0001 мг (0,1 мкг) хлор-иона в 1 мл раствора. 0,002 мг (2 мкг) хлор-иона в 1 мл раствора дают при этой реакции хорошо заметную опалесценцию.
Определение проводят следующим образом: к 10 мл раствора испытуемого препарата, приготовленного, как указано в соответствующей частной статье, прибавляют 0,5 мл азотной кислоты, 0,5 мл раствора нитрата серебра, перемешивают и через 5 мин сравнивают с эталоном, состоящим из 10 мл эталонного раствора Б и такого же количества реактивов, какое прибавлено к испытуемому раствору.
Опалесценция, появившаяся в испытуемом растворе, не должна превышать эталон.
Эталонный раствор хлор-иона. 0,659 г прокаленного хлорида натрия растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки (раствор А). 5 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки (раствор Б). Этот раствор содержит 0,002 мг (2 мкг) хлор-иона в 1 мл.
Испытание на сульфаты
Растворы сульфатов в зависимости от их концентрации образуют с растворами солей бария белый осадок или муть, не исчезающие от прибавления разведенной хлористоводородной кислоты.
Предельная чувствительность реакции 0,003 мг (3 мкг) сульфат-иона в 1 мл раствора. 0,01 мг (10 мкг) сульфат-иона в 1 мл раствора дает при этой реакции через 10 мин заметную муть.
Определение проводят следующим образом: к 10 мл раствора испытуемого препарата, приготовленного, как указано в соответствующей частной статье, прибавляют 0,5 мл разведенной хлористоводородной кислоты и 1 мл раствора хлорида бария, перемешивают и через 10 мин сравнивают с эталоном, состоящим из 10 мл эталонного раствора Б и такого же количества реактивов, какое прибавлено к испытуемому раствору.
Муть, появившаяся в испытуемом растворе, не должна превышать эталон.
Эталонный раствор сульфат-иона. 1,814 г сульфата калия, высушенного при температуре от 100 до 105°С до постоянной массы, растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки (раствор А). 10 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки (раствор Б). Этот раствор содержит 0,01 мг (10 мкг) сульфат-иона в 1 мл.
Источник
